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當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司>>生化測(cè)試盒>>谷胱系列>> 50管/48樣硫氧還蛋白氧化還原酶TrxR測(cè)試盒_谷胱系列

硫氧還蛋白氧化還原酶TrxR測(cè)試盒_谷胱系列

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50管/48樣

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廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2022-07-26 10:28:42瀏覽次數(shù):611次

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硫氧還蛋白氧化還原酶TrxR測(cè)試盒_谷胱系列

測(cè)定方法:_分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

注    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是(GSH)氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。

硫氧還蛋白氧化還原酶TrxR測(cè)試盒_谷胱系列

測(cè)定原理:

TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通過測(cè)定412nm波長(zhǎng)處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性。

自備儀器和用品:

低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:粉劑×1管,4℃保存。臨用前加入2mL蒸餾水溶解。


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粗酶液提取:

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3.  血清等液體:直接測(cè)定。

TrxR測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412nm,用蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑一在25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動(dòng)物)預(yù)熱30min。

3. 空白管:取微量玻璃比色皿或96孔板,加入20μL試劑二,20μL試劑三,160μL試劑一,迅速混勻后于412 nm測(cè)定10 s和310 s吸光度,記為A1和A2。△A空白管=A2-A1。

4. 測(cè)定管:取微量玻璃比色皿或96孔板,加入20μL試劑二,20μL試劑三,140μL試劑一,20μL上清液,迅速混勻后于412 nm測(cè)定10 s和310 s吸光度,記為A3和A4。△A測(cè)定管=A4-A3。

注意:空白管只需測(cè)定一次。


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