谷胱γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測定測試盒微量法
測定方法:微量法
產品規格:100管/96樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
γ-GT是γ-谷氨酰循環中的關鍵酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基轉移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解,產生Glu鹽,在細胞外(GSH)新陳代謝中起了重要的作用。
谷胱γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測定測試盒微量法
測定原理:
γ-GT催化谷氨酰對硝基苯胺中γ-谷氨酰基轉移給N-甘氨酰Gly,生成對硝基苯胺,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm光吸收增加速率,來計算γ-GT酶活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水
試劑組成和配制:
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體14.8mL×1瓶,4℃保存。
工作液(在試劑二瓶中配制):臨用前配制,把試劑三倒入試劑二瓶中,充分溶解(室溫過低時可以40℃水浴促進溶解);然后把試劑四倒入試劑二瓶中,混勻后室溫保存。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。