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當前位置:上海紀寧實業有限公司>>生化測試盒>>谷胱系列>> 50管/48樣γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法

γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 10:18:36瀏覽次數:633次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/48樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

γ-GT是γ-谷氨酰循環中的關鍵酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基轉移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解,產生GLU鹽,在細胞外(GSH新陳代謝中起了重要的作用。

測定原理:

γ-GT催化谷氨酰對硝基苯胺中γ-谷氨酰基轉移給N-甘氨酰Gly,生成對硝基苯胺,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm光吸收增加速率,來計算γ-GT酶活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水


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試劑組成和配制:

試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑四:液體37mL×1瓶,4℃保存。

工作液(在試劑二瓶中配制):臨用前配制,把試劑三倒入試劑二瓶中,充分溶解(室溫過低時可以40℃水浴促進溶解);然后把試劑四倒入試劑二瓶中,混勻后室溫保存。

γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法

粗酶液提取:

1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體:直接測定。

γ-GT測定操作

1. 分光光度計預熱30min,調節波長到405 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑二置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴中預熱30min(保證無沉淀)。

3. 測定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL上清液,900μL工作液,混勻后于405nm測定10 s和70 s時吸光度,記為A1和A2。



γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法

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谷胱γ谷氨酰轉肽酶γ-GT測定測試盒微量法

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