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(GSH)還原酶(GR)測試盒谷胱系列_分光光度法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 10:40:28瀏覽次數:599次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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(GSH)還原酶(GR)測試盒谷胱系列_分光光度法

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/48樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是(GSH)氧化還原循環的關鍵酶之一(通常昆蟲中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH,有助于維持體內GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應中對活性氧清除起關鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-(GSH)循環途徑。

(GSH)還原酶(GR)測試盒谷胱系列_分光光度法

測定原理:

GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時NADPH脫氫生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長無吸收峰;通過測定340 nm吸光度下降速率來測定NADPH脫氫速率,從而計算GR活性。

自備儀器和用品:

低溫離心機、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水

試劑組成和配置:

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×2支,-20℃保存。臨用前加入1.2mL蒸餾水,混勻。

試劑三:粉劑×2支,-20℃保存。臨用前加入0.6mL蒸餾水,混勻。

粗酶液提取:

1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。

3.血清等液體:直接測定。


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操作步驟:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑一置于25℃(普通物質)或者37℃(哺乳動物)中預熱30min。

3. 測定管:取微量石英比色皿或96孔板,依次加入10μL試劑三,20μL試劑二,150μL試劑一,20μL上清液,混勻,于340nm迅速測定初始吸光度和180 s吸光度,記為A測1和A測2,△A測定管= A測1﹣A測2。



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