谷胱系列氧化型(GSSG)含量測(cè)試盒_微量法
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)重要的氧化還原對(duì)之一。因此，測(cè)定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài)，也是(GSSG)氧化還原循環(huán)的主要指標(biāo)之一。
谷胱系列氧化型(GSSG)含量測(cè)試盒_微量法
測(cè)定原理：
利用2-VP法測(cè)GSSG含量。
自備儀器和用品：
低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體600μL×1支，4℃保存。
試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體2.5mL×1瓶，4℃保存。
試劑五： 液體15μL×1瓶，-20℃保存。臨用前加入0.3mL試劑三稀釋?zhuān)?℃保存。
試劑六：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入20 mL試劑三溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
粗酶液提?。?/p>
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液（如上清不清澈，再離心3min）待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；8000g 4℃離心10min，取上清液（如上清不清澈，再離心3min）混勻待測(cè)。
3. 血清等液體：直接測(cè)定。
GSSG含量測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動(dòng)物）水浴中保溫30min。
3.取1 mL EP管，加入100μ L上清液，5 μ L試劑二，蓋緊后混勻，得混合液，置于37℃水浴30min；取21μ L混合液于96孔板，然后依次加入20 μ L試劑四、2 μ L試劑五和140 μ L試劑六，迅速混勻后，測(cè)定30 s和150 s光吸收A1和A2，計(jì)算ΔA=A2-A1。
環(huán)保在線