酯酶系列_乙酰酯酶(AchE)測試盒_微量法
測定方法：微量法
產品規格：100管/96樣
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
AchE屬于Ser水解酶，廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰（Ach）水解，在神經傳導調節中起重要作用。
酯酶系列_乙酰酯酶(AchE)測試盒_微量法
測定原理：
AchE催化Ach水解生成二硫對硝基苯甲酸（DTNB）作用生成5-巰基-硝基苯甲酸（TNB）；TNB在412nm處有吸收峰，通過測定412 nm吸光度增加速率，計算AchE活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1支，4℃保存。臨用前加入1.3 mL試劑二，充分震蕩溶解。
試劑四：粉劑×1支，4℃保存。臨用前加入1.3 mL試劑二，充分震蕩溶解。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清液待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。
測定操作：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調節波長到412 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二置于37℃水浴中預熱30min。
3. 取微量石英比色皿/96孔板，依次加入20μL上清液、160 μL試劑二、10μL試劑三和10μL試劑四，迅速混勻，于412nm處測定3min內吸光值變化，第10s吸光值記為A1，第190s吸光值記為A2。△A測定管=A2-A1。
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