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人B淋巴細胞急性白血病細胞 BALL-1產品運輸方式:干冰或者活體細胞運輸,本公司會保證細胞運輸中的存活率本公司細胞株低價保證質量,免費快遞直達。本公司擁有*的專業細胞培養技術人員為您的細胞培養準備詳細的技術咨詢。齊一生物科技(上海)有限公司:。Web:www.qiyibio。。com
人B淋巴細胞急性白血病細胞 BALL-1細胞培養方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML培養基繼續培養:超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4,將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的*消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37度 5%CO2 培養
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養基參考
500ml基礎培養基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養箱中使用
磷酸鹽緩沖液/Phosphate Buffer solution
碳酸鹽緩沖液/Carbonate Buffer solution
TRIS-HC1緩沖液/三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液/TRIS-HC1 Buffer solution
醋酸鈉醋酸緩沖液/Sodium acetate -Acetic acid Buffer solution
*鈉鹽酸緩沖液/Barbitone sodium-Hydrochloric acid Buffer solution
硼砂鹽酸緩沖液/Borax-Hydrochloric acid Buffer solution
檸檬酸鈉鹽酸緩沖液/Sodium citrate-Hydrochloric acid Buffer solution
飽和苦味酸緩沖液/Saturated picric acid Buffer solution
Xmol/L鹽酸緩沖液/Xmol/L-Hydrochloric acid Buffer solution
Xmol/L硫酸緩沖液/Xmol/L-Sulphuric acid Buffer solution
Xmol/L草酸緩沖液/Xmol/L-Oxalate Buffer solution
Hank′s液/Hank′s solution
任氏液
盧戈液
三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽/三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽/三(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽/三(2-羧乙基)磷鹽酸鹽/三(2-酰乙基)磷鹽酸鹽/TCEP
α-硫代甘油/3-巰基-1,2-丙二醇/1-硫代甘油/1-巰基甘油/1-硫甘油/1-硫代丙三醇/硫代丙三醇/硫代甘油/3-硫基-1,2-丙烷二醇/1-Thioglycerol
β-甘油磷酸二鈉五水物/β-*五水物/甘油2-磷酸二鈉鹽五水物/ 2-甘油磷酸二鈉鹽五水物/β-磷酸甘油酯二鈉鹽五水合物/Disodium beta-glycerol phosphate pentahydrate
β-甘油磷酸二鈉水合物/β-*水合物/甘油2-磷酸二鈉鹽水合物/2-甘油磷酸二鈉鹽水合物/β-磷酸甘油酯二鈉鹽水合物/BGP
α-甘油磷酸二鈉/α-*/DL-α-*/α-Glycerophosphate disodium salt hexahydrate
α-甘油磷酸鎂鹽/DL-α-甘油磷酸鎂鹽/甘油磷酸鎂/甘油磷酸酯鎂鹽/DL-α-Glycerol phosphate magnesium salt hydrate
礦物油/石蠟油/液體石蠟/白礦油/白油/白色礦物油/礦脂/凡士林油/白色油/白礦物油/礦油/Mineral oil/Paraffin oil
*/十八碳-9,12-二烯酸/(Z,Z)-9,12-十八烷二烯酸/順,順-9,12-十八碳二烯酸/亞麻油酸/十八碳-9,12,15-三烯酸/亞麻酸/Linoleic acid
油酸/順式-9-十八烯酸/十八碳-9-烯酸/紅油/十八烯酸/十八碳烯-9-酸/(Z)-9-十八烯酸/順-9-十八烯酸/順式十八烯-9-酸/Oleic acid
5-氟乳清酸/5-FOA
莽草酸/-(-)莽草酸/3,4,5-三羥基-1-環己烯-1-甲酸/3α,4α,5β-三羥基環已烯羧酸/蟒草酸/卡瓦根提取物/Shikimic acid
棕櫚油酸/順式-9-十六(碳)烯酸/9-十六碳烯酸/順-9-十六烯酸/軟脂油酸/順-9-十六碳烯酸/順-9-十六碳烯酸/Palmitoleic acid
反式-1,2-環己二胺四乙酸/反-1,2-環己二胺-N,N,N',N'-四乙酸/1,2-環己二胺四乙酸/反式-1,2-二氨基環己烷-N,N,N′,N′-四乙酸/反-1,2-二氨基環己基四乙酸單水合物/1,2-二氨基環己四乙酸一水化物/(1,2-環己基二腈)四乙酸鹽單水合物/DCTA/CyDTA
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