T-47D乳腺管癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）T-47D乳腺管癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1,1'-Diethyl-2,2'-quinotricarboCyanine iodide 1-乙基-2-[7-（1-乙基-2（1H）-喹啉亞基）庚-1,3,5-三烯基]喹啉碘化物 17695-32-8
N,N-DIETHYLHYDRAZINE  616-40-0
1,1-DIMETHOXYETHENE  922-69-0
1,1'-DI-N-HEPTYL-4,4'-BIPYRIDINIUM DIBROMIDE 二溴化-1,1ˊ-二庚基-4,4ˊ-聯(lián)吡啶鎓 6159/5/3
1,1-DINITROETHANE  600-40-8
1,1-dioxidotetrahydrothien-3-ylaMine  6338-70-1
1,1-Dioxidotetrahydrothien-3-ylaMine hydrochloride 3-氨基環(huán)丁砜 51642-03-6
1,1-Dioxo-tetrahydro-thiopyran-4-one 四氫噻喃-4-酮 17396-35-9
1,1'-FERROCENEDIMETHANOL 1,1'-二茂鐵二甲醇 1291-48-1
1,1'-Oxydi-2-propanol 一縮二丙二醇 110-98-5
1,1'-Spirobi[1H-indene]-7,7'-diaMine,2,2',3,3'-tetrahydro-, （1S）-  885462-88-4
Ethylene-1,2-dithiole  34725-64-9
1,2 Pentanediol 1,2-戊二醇 5343-92-0
HEXA-SODIUM-BENZENE-HEXATHIOLATE  110431-65-7
PentabroMostyrene  53097-59-9
1,2,3,4,6,7,8,9-OCTAHYDROPHENAZINE 八氫吩嗪 4006-50-2
1,2,3,4,6-Penta-O-acetyl-b-D-Mannopyranose  4026-35-1
1,2,3,4,6-PENTA-O-GALLOYL-BETA-D-GLUCOPYRANOSE 1,2,3,4,6-O-五沒(méi)食子酰葡萄糖 14937-32-7
1,2,3,4-TETRAHYDRO-2-NAPHTHYLAMINE 1,2,3,4-四氫-2-萘胺 2954-50-9
1,2,3,4-TETRAHYDRO-ISOQUINOLINE-4-OL  51641-23-7
1,2,3,4-TETRAHYDRO-ISOQUINOLINE-7-CARBOXYLIC ACID  160346-57-6
1,2,3,4-Tetra-O-acetyl-6-O-（2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-D-Mannopyranosyl）-D-Mannopyrannose  72691-29-3
1,2,3,4-TETRA-O-ACETYL-BETA-L-FUCOPYRANOSE  50615-78-6
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。