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TE-11食管癌細胞

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更新時間:2016-07-18 06:17:32瀏覽次數:266次

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TE-11食管癌細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)TE-11食管癌細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產品:
1,10-Phenanthroline hydrate 1,10-菲羅啉(一水合物) 5144-89-8
1,2,3,4-TETRA-O-ACETYL-BETA-L-XYLOPYRANOSE  78088-17-2
1,2,3,5-tetrachlorobenzene 1,2,3,5-四氯苯 634-90-2
2-Thioxanthine 2-巰基-6-羥基嘌呤 2487-40-3
1,2,3,9-Tetrahydro-4H-carbazole-4-one 四氫咔唑酮 15128-52-6
1,2,3-thiadiazole-4,5-dicarboxylic acid 1,2,3-噻二唑-4,5-二甲酸 4609-49-8
1,2,3-Trichlorobenzene 1,2,3-三氯苯 87-61-6
1,2,3-TriMethoxypropane  20637-49-4
1,2,4,5-tetrachloro-3-Methylbenzene  1006-31-1
1,2,4,5-Tetrakis(dibroMoMethyl)benzene 1,2,4,5-四(二溴甲基)苯 14939-02-7
1,2,4-OXADIAZOLE-3-METHYLAMINE, >=95%  766500-04-3
1,2,4-Triazol-5-one 1,2,4-三唑-5-酮 42131-33-9
1,2,5,6,-TetraMethylnaphthalene  2131-43-3
1,2,5,6-Tetrahydro-4-hydroxy-2-oxo-3-pyridinecarboxylic acid Methyl ester sodiuM salt 1,2,5,6-四氫-4-羥基-2-氧代-3-哌啶甲酸甲酯鈉鹽 198213-15-9
1,2,Benzene dicarboxylic acid, di C6-8 branched alkyl esters, C7 rich 鄰苯二甲酸二C6-8支鏈烷基酯(富C7) 71888-89-6
1,2:4,5-DI-O-ISOPROPYLIDENE-BETA-D-FRUCTOPYRANOSE 1,2:4,5-DI-O-ISOPROPYLIDENE-BETA-D-FRUCTOPYRANOSE 25018-67-1
1,2-Benzene dicarboxylic acid, 2,2-diMethlyl-1-(1-Methyl ethyl)-3-(2-Methyl 1-oxopropoxy) phenyl Methyl ester  16883-83-3
4,5-Dihydroxy-1,2-benzenedicarbonitrile 4,5-二羥基-1,2-苯二腈 300853-66-1
1,2-Benzenedicarboxylicacid,4-hydrazino-(9CI)  169739-72-4
1-Hydroxy-2-oxa-1-ioda(III)indan-3-one 1-羥基-1,2-苯碘酰-3(1H)-酮 131-62-4
1,2-Benzisoxazol-3-aMine,6-chloro-(9CI)  89692-53-5
1,2-BENZISOXAZOLE, 3,6-DIMETHYL-  29505-13-3
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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