2014 11-07

蛋白質(zhì)鹽析透析

一、蛋白質(zhì)鹽析（一）目的要求了解蛋白質(zhì)的沉淀作用，加深對(duì)影響蛋白質(zhì)膠體分子穩(wěn)定性因素的認(rèn)識(shí)。（二）實(shí)驗(yàn)原理水溶液中蛋白質(zhì)分子由于表面生成水化層及蛋白質(zhì)分子上某些基團(tuán)離子化而使蛋白質(zhì)分子表面帶有電荷，增...

2014 11-07

吸附法分離純化蛋白質(zhì)

在蛋白質(zhì)的提純方法中，選擇性吸附也是應(yīng)用歷史較久迄今仍在廣泛采用的方法之一。早期工作常用高嶺土（我國(guó)的一種土質(zhì)，其分子式大致是AL2O3·2SiO2·2H2O）、氧化鋁（AL2O3）及活性炭等吸附劑，...

2014 10-24

酵母RNA的提制

一、目的：學(xué)習(xí)和掌握從酵母中提制RNA的原理和方法，從而加深對(duì)核酸性質(zhì)的認(rèn)識(shí)。二、原理：提取和制備RNA的首要問(wèn)題是選RNA含量高的材料。微生物是工業(yè)上大量生產(chǎn)核酸的原料，其中RNA的提制以酵母zui...

2014 10-24

血清中COMP檢測(cè)及臨床意義

背景介紹：COMPzui早被認(rèn)為具有軟骨特異性，表達(dá)于軟骨細(xì)胞周圍的基質(zhì)中，但近年研究表明，COMP在所有關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)中均有表達(dá)，包括韌帶、半月板、肌腱、滑膜。此外，視網(wǎng)膜和血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)也能表達(dá)COM...

2014 10-11

蛋白質(zhì)純化技術(shù)服務(wù)

蛋白質(zhì)純化技術(shù)服務(wù)1、蛋白質(zhì)純化服務(wù)流程①原始材料的澄清;②目的重組蛋白的捕獲(GST、His標(biāo)簽蛋白);③破碎含有蛋白質(zhì)的細(xì)胞;④蛋白質(zhì)粗提，清除雜質(zhì):去除核酸、原生質(zhì)體、不溶物或者洗滌包涵體等;⑤...

2014 10-11

ELISA技術(shù)服務(wù)

1、ELISA服務(wù)流程①待測(cè)抗原/抗體的獲得;②抗原/抗體的包被;③加入抗體/抗原，37℃溫育;④底物液顯色;⑤終止反應(yīng);⑥ELISA檢測(cè)儀檢測(cè)。注：根據(jù)ELISA方法不同，操作步驟有區(qū)別。2、ELI...

2014 09-26

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)1、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)流程①?gòu)膭?dòng)物組織切割、分離所需培養(yǎng)的組織(原代培養(yǎng));②用滅菌PBS多次清洗組織，充分剪碎組織，用滅菌PBS清洗組織;③靜置數(shù)分鐘，使組織沉淀于管底，棄上清;④*充分消...

2014 09-26

MTT技術(shù)服務(wù)

MTT技術(shù)服務(wù)1、MTT服務(wù)流程①收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞并計(jì)數(shù);②接種細(xì)胞;配成單細(xì)胞懸液，接種于96孔板，接種密度為每孔103-104;③培養(yǎng)細(xì)胞：5%CO2，37℃孵育，培養(yǎng)1天～5天(需根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康?..

2014 09-20

美國(guó)藥典（USP）簡(jiǎn)介

U.S.Pharmacopeia/NationalFormulary《美國(guó)藥典/國(guó)家處方集》（簡(jiǎn)稱USP/NF）。是由美國(guó)政府所屬的美國(guó)藥典委員會(huì)（TheUnitedStatesPharmacopei...

2014 09-20

制藥用水-2015中國(guó)藥典

水是藥物生產(chǎn)中用量大、使用廣的一種輔料,用于生產(chǎn)過(guò)程和藥物制劑的制備。本版藥典中所收載的制藥用水,因其使用的范圍不同而分為飲用水、純化水、注射用水和*。一般應(yīng)根據(jù)各生產(chǎn)工序或使用目的與要求選用適宜的制...

2014 09-12

生長(zhǎng)率測(cè)定法

生長(zhǎng)率測(cè)定法——分離培養(yǎng)基從菌落數(shù)量上判斷分離培養(yǎng)基的選擇效果及抑制性質(zhì)控菌株的選擇生化性狀典型的強(qiáng)陽(yáng)性質(zhì)控菌株生化性狀較弱的陽(yáng)性質(zhì)控菌株不同生化性狀的陽(yáng)性質(zhì)控菌株生長(zhǎng)受到抑制的陰性質(zhì)控菌株參考培養(yǎng)基...

2014 09-12

霉菌酵母菌樣品的稀釋

固體和半固體樣品：稱取25g樣品至盛有225mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖，即為1:10稀釋液?；蚍湃胧⒂?25mL無(wú)菌蒸餾水的均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器(不推薦使用刀片式均質(zhì)器)拍打2min，制成...

2014 09-04

MTT實(shí)驗(yàn)前注意事項(xiàng)及貼壁細(xì)胞/懸浮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)前應(yīng)明確的問(wèn)題1.選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種濃度。一般情況下，96孔培養(yǎng)板的一內(nèi)貼壁細(xì)胞長(zhǎng)滿時(shí)約有105個(gè)細(xì)胞。但由于不同細(xì)胞貼壁后面積差異很大，因此，在進(jìn)行mtt試驗(yàn)前，要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其貼壁率、倍增時(shí)...

2014 09-04

G418原代細(xì)胞的篩選的Protocol

分析轉(zhuǎn)化的功能和表達(dá)需要DNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞染色體。外源基因進(jìn)入細(xì)胞后，部分能夠通過(guò)細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，根據(jù)細(xì)胞類型，至多80%的進(jìn)入核內(nèi)的外源DNA得到瞬時(shí)表達(dá)。極少數(shù)情況下，進(jìn)入細(xì)胞的外源DN...

2014 08-28

細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆占?xì)胞計(jì)數(shù)的方法。了解區(qū)分細(xì)胞存活狀態(tài)的方法。實(shí)驗(yàn)用品：0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液、無(wú)水乙醇或95%乙醇溶液、脫脂棉普通顯微鏡、試管、吸管、毛細(xì)吸管、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、綢布。實(shí)驗(yàn)原理：在細(xì)胞培養(yǎng)工作中，...

2014 08-28

白細(xì)胞計(jì)數(shù)法（試管法）

一、原理用稀乙酸將血液稀釋20倍，使紅細(xì)胞全部溶解，滴入白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)，求得每立方毫米血液中的白細(xì)胞數(shù)。二、器材和試劑1.器材生物顯微鏡、Neubauer氏血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、0.02ml吸...

2014 08-23

SDS-PAGE膠的干燥方案

凝膠干燥時(shí)遇到的主要問(wèn)題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質(zhì)量，因此，應(yīng)盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態(tài)，使其真...

2014 08-23

SDS-PAGE凝膠電泳凝膠的制備方法

SDS-PAGE電泳可用于分離蛋白質(zhì)和核苷酸，這里綜述了SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)原理、試劑和器材、以及實(shí)驗(yàn)操作步驟。一.實(shí)驗(yàn)原理：SDS-PAGE是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行量化，比較及特性鑒定的一種經(jīng)濟(jì)、快速、而且可...

2014 08-14

酵母培養(yǎng)方法

問(wèn)：現(xiàn)在工作的地方老板要養(yǎng)酵母，我對(duì)酵母不是很了解，希望好心人發(fā)一些酵母的基本知識(shí)以及酵母培養(yǎng)注意的問(wèn)題和培養(yǎng)基的配制甚么的，謝謝大家！答：酵母菌是一些單細(xì)胞真菌，目前已知有1000多種酵母。酵母可以...

2014 08-14

酵母總RNA提取方法

問(wèn)：請(qǐng)問(wèn)大家提取酵母的總RNA都用什么方法？有好用的試劑盒嗎？酵母總RNA提取應(yīng)該注意什么？答：使用熱酚法抽提酵母RNA,很好用，至今沒有失敗過(guò)。(1)將酵母細(xì)胞培養(yǎng)在3ml選擇性培養(yǎng)基中，30℃過(guò)夜...