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細胞內一氧化氮（NO）活性檢測試劑盒抗體返回列表頁

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產品型號16360

品牌AAT Bioquest

廠商性質代理商

所在地西安市

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更新時間：2024-01-31 19:11:36瀏覽次數：250次

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產品簡介

細胞內一氧化氮（NO）活性檢測試劑盒適合于酶標儀橙色檢測是美國AAT Bioquest生產的用于檢測細胞內一氧化氮活性的試劑盒，一氧化氮（NO）是涉及許多生理和病理過程的重要生物調節劑。

詳情介紹

細胞內一氧化氮（NO）活性檢測試劑盒 抗體適合于酶標儀橙色檢測是美國AAT Bioquest生產的用于檢測細胞內一氧化氮活性的試劑盒，一氧化氮（NO）是涉及許多生理和病理過程的重要生物調節劑。改變的NO產生涉及各種免疫，心血管，神經變性和炎性疾病。作為自由基，NO被快速氧化，并且體內存在相對低濃度的NO。檢測和了解NO在生物系統中的作用一直具有挑戰性。 Cell Meter 熒光細胞內一氧化氮檢測試劑盒提供了一種監測活細胞內細胞內NO水平的敏感工具。

Nitrixyte 探針在我們的試劑盒中開發和使用，作為DAF-2的優異替代品，用于檢測和成像細胞中的游離NO。與常用的DAF-2探針相比，Nitrixyte 探針具有更好的光穩定性和增強的細胞滲透性。該特殊試劑盒使用Nitrixyte Orange，可與NO反應生成亮橙色熒光產品，其光譜特性與Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加載到活細胞中，使用Cy3®或TRITC過濾器可以方便地監測其熒光信號。該試劑盒針對熒光成像和酶標儀應用進行了優化。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的細胞內一氧化氮（NO）活性檢測試劑盒 抗體。

適用儀器

流式細胞儀
Ex:	640 nm
Em：	660/20 nm
通道:	APC 通道

實驗方案

樣本實驗方案

概述

1.準備細胞（0.5-1×106細胞/ mL）
2.加入1 µL 500X Nitrixyte NIR
3.將細胞與測試化合物和Nitrixyte NIR在37oC下孵育所需的時間
4.使用APC通道通過流式細胞儀分析細胞

溶液配制

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復凍融循環。
1.1 NONOate陽性對照儲備液（50 mM）：
將200 uL ddH2O加入小瓶NONOate陽性對照（組分B）中，制成50 mM NONOacte陽性對照處理原液。

2.工作溶液

用測定緩沖液（組分C）稀釋50 mM NONOate陽性對照原液，制成1-2 mM NONOate陽性對照工作溶液。

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樣品操作及實驗分析

1.對于每個樣品，在0.5 mL溫熱培養基或您選擇的緩沖液中以5×105至1×106細胞/ mL的密度制備細胞。注意：應單獨評估每個細胞系，以確定誘導NO的佳細胞密度。

2.將1 µL 500X Nitrixyte NIR（組分A）加入0.5 mL細胞懸液中。注意：對于貼壁細胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整，并在用Nitrixyte NIR孵育之前用含血清的培養基洗滌細胞一次。

3.將細胞與測試化合物和Nitrixyte NIR在37oC下孵育所需的時間，以生成內源性或外源性NO。注意：適當的孵育時間取決于所用的單個細胞類型和測試化合物。優化每個實驗的孵育時間。注意：我們已在37°C的細胞培養基中將Raw 264.7細胞與Nitrixyte NIR工作溶液，20 µg / mL脂多糖（LPS）和1 mM L-精an酸（L-Arg）孵育16小時。

4.旋轉已用Nitrixyte NIR預孵育30分鐘的細胞。用1 mM DEA NONOate陽性對照工作溶液重懸細胞，并在37oC下再孵育30分鐘。有關詳細信息，請參見圖1。

5.使用流式細胞儀監測APC通道（Ex / Em = 640/675 nm）的熒光強度。