張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>肽酶和蛋白酶>> 13470胱天蛋白酶Caspase抑制劑 FAM-VAD-FMK
Ex (nm) | 493 | Em (nm) | 517 |
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分子量 | 691.66 | 溶劑 | DMSO |
儲存條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
胱天蛋白酶Caspase抑制劑 FAM-VAD-FMK是美國AAT Bioquest生產的用于Caspase的試劑,FAM-VAD是一種綠色熒光細胞滲透性polycaspase抑制劑靶向胱天蛋白酶1,2,3,6,8,9或10。一旦進入細胞,所述抑制劑共價結合于胱天蛋白酶活性,其產生綠色熒光。當加入到細胞群體中,FAM-VAD-FMK探針進入每個細胞和共價結合到駐留在胱天蛋白酶活性的異二聚體的大亞基,從而抑制進一步的酶活性的反應性半*殘基。結合的標記試劑被保留在細胞內,而任何未結合的試劑將擴散出細胞,并沖走。綠色熒光信號的直接測量活性胱天蛋白酶的存在于細胞中的試劑加入的時間量。含有結合的標記試劑細胞可以通過96 - 孔板的基于熒光,熒光顯微鏡或流式細胞儀進行分析。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的胱天蛋白酶Caspase抑制劑 FAM-VAD-FMK。
樣品實驗方案
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
1.1 FAM-VAD-FMK儲備溶液:
在DMSO中準備2-5 mM的儲備溶液。
樣品操作及分析
1.根據需要處理細胞。
2.通過用20 mM Hepes緩沖液(HHBS)在Hanks中稀釋DMSO儲備溶液,制備2X滲透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。
3.將等體積的處理過的細胞與2X半胱天冬酶底物測定溶液混合,并在37°C,5%CO2的培養箱中孵育細胞至少1小時。
4.用HHBS清洗細胞至少一次。
5.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。
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