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TRIzol Reagent

參  考  價:780
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

100 ml 780元 15盒可售

更新時間:2024-05-22 08:53:00瀏覽次數(shù):228次

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貨號 XG-P3014 規(guī)格 100 ml
包裝 盒裝 用途 僅供科研研究實驗
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TRIzol Reagent

TRIzol Reagent

貨號

規(guī)格

分類

XG-P3014

100 ml

RNA相關(guān)產(chǎn)品

是一種可提取動植物樣品中RNA 的制品。樣品在 TRIzol Reagent 中能夠充分被裂解,在樣品勻漿或裂解過程中,它可保持 RNA 的完整性,同時裂解細胞,溶解細胞內(nèi)含物。TRIzol Reagent 具有很強的廣譜性,可以適用于各種樣品的總 RNA 提取,提取過程方便快速,整個操作在一小時內(nèi)便可以完成。該試劑可用于小量樣品(50-100 mg 組織、1x106 細胞)也適用于大量樣品(≥1g組織、>107 細胞)。對人、動物、植物組織、細菌均適用,可同時處理大量不同樣品,整個提取過程在一小時內(nèi)即可完成。分離的總RNA蛋白質(zhì)和 DNA污染極低,可用于NorthernBlot、反轉(zhuǎn)錄、ployA 篩選、體外翻譯、RNase 保護分析和基因克隆。
儲存:2-8℃避光保存,可保存 2 年。
注意:該試劑含有強變性劑,請勿直接于皮膚接觸或吞咽,若接觸到皮膚或眼睛請盡快到醫(yī)院處理。實驗時務必穿實驗服,戴手套。
操作方法
自備試劑:氯仿,異丙醇,70%乙醇(DEPC 水配置),RnaseFree H2O。
Ⅰ 實驗前準備:RNA 制備的關(guān)鍵是要抑制細胞中的 RNA 分解酶和防止所用器具及試劑中的 RNA 分解酶的污染。因此,在實驗中必須采取以下措施:戴一次性干凈手套;使用 RNA 操作專用實驗臺;在操作過程中避免講話等等。通過以上辦法可以防止實驗者的汗液、唾液中的 RNA 分解酶的污染。
注意事項:
1. 盡量使用一次性塑料器皿,若用玻璃器皿,應在使用前用0.1%DEPC 水溶液在 37℃處理 12h,然后在 120℃高壓滅30min 以除去殘留的 DEPC。
2. 用于 RNA 實驗的試劑,須使用干熱滅菌(180℃,60min)或使用上述方法進行 DEPC 水處理滅菌后的玻璃容器盛裝(也可以使用 RNA 實驗用的一次性塑料容器),使用的無菌水須用 0.1%的 DEPC處理后再進行高溫高壓滅菌。
3. RNA 實驗用的試劑和無菌水都應專用,避免混用后交叉污染。
TRIzol Reagent


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一、模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;

二、引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;

三、dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;

四、Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;

五、PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;

六、酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產(chǎn)物;


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①Oligo dT
選擇Oligo dT時,要求RNA必須有Poly A,所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT,對RNA樣品的質(zhì)量要求較高,不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應,建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT,尤其適合模板豐度很低的情況(比如某個gene表達量很低)。選擇隨機引物時,鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板,然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關(guān)系,一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng,如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng,可能會導致小片段產(chǎn)物(<500bp)的增加和長片段、全長產(chǎn)物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物(GSP)是某個基因序列的一部分,與模板互補的引物。該引物需要結(jié)合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結(jié)合,每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此,當分析多種目標時,則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同,所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物,建議對退火溫度進行優(yōu)化。

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