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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2023-05-09 09:30:55瀏覽次數：613
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操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
商品屬性：
產品名稱：人畸胎癌細胞：NCCIT
貨號：BJ-X96945
規格：1×10?cells/T25培養瓶
分類：細胞系
商品介紹：
名稱 NCCIT (人畸胎癌細胞) 種屬 人類 年齡（性別） 男性，24歲 組織來源 多能性胚胎癌；畸胎癌 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 上皮細胞樣 背景描述 NCCIT was established by Shinichi Teshima (National Cancer Institute, Tokyo, Japan) in 1985 from a mediastinal mixed germ cell tumor. 生物安全等級 1 生長培養基 RPMI-1640＋10% FBS＋1%P/S 推薦傳代比例 1:4-1:8 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性 Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 107 cells. 保藏機構 ATCC; CRL-2073 |
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：產品僅用于科研
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 )1g BL21 感受態細胞0.1 mL×10
Lipoic acid( 抗氧化劑 )0.5g BCECF AM1mg
L-NAME(eNOS 抑制劑 )200mg BCA 法蛋白定量試劑盒500 次
L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )5mg BAY11-7082(NF-κB 抑制劑 )2mg
Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )10mg ATP 溶液，2.5mM2mL
FITC標記的禽腦脊髓炎病毒AEV抗體
FITC標記的磷酸化活化復制因子2抗體
FITC標記的磷酸化非受體激酶c-Abl抗體
FITC標記的錨蛋白重復域54抗體
FITC標記的α酪蛋白抗體
人畸胎癌細胞：NCCIT大鼠補體C3a(C3a)elisa檢測試劑盒
大鼠補體C3a（C3a）elisa檢測試劑盒
大鼠補體C5a(C5a)elisa檢測試劑盒
大鼠補體C5a（C5a）elisa檢測試劑盒
大鼠補體成分3(C3)elisa檢測試劑盒
