細胞:Y-1細胞
中文名稱:小鼠腎上腺皮質瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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Foxd3基因是干細胞多能性,即干細胞在哺乳動物胚胎中分化為不同類型組織細胞的能力,所必需的因子。
干細胞具有巨大的疾病治療潛力,如果利用干細胞,就應該了解它們分化能力背后的基礎。
在干細胞的所有調控基因中,似乎是Foxd3基因的表達起著防止干細胞迅速分化也就是發育成不同組織類型的作用,控制干細胞的分化才能使胚胎維持有足夠的干細胞保證繼續的正常發育。
為研究Foxd3基因的功能,培養出Foxd3基因突變失活的小鼠品系,然后對這些小鼠進行基因分析以確定Foxd3蛋白的作用。
Foxd3缺失的胚胎不會存活很長時間。雖然存在部分卵黃囊(胚外膜的一種,供應早期胚胎發育時需要的養分)的形式,然而含有所有組成發育胚胎的機體的細胞的內部細胞團無法擴大到足以產生胚胎和一些支持組織的程度。
沒有Foxd3,小鼠胚胎就無法維持足夠的干細胞幸免于發育過程中的一個關鍵點。發現Foxd3是少數幾個作為發育胚胎的‘總開關’的基因之一。