細胞：B16-F10細胞
中文名稱：小鼠皮膚黑色素瘤細胞
生長特性：貼壁細胞
培養基：1640 培養基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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干細胞維持多能性所必需的基因
基因通過打開或關閉其它基因作為對胚胎中信號的應答從而決定了干細胞的命運。
Foxd3可以加入到早先識別出的胚胎發生的早期階段中胚胎控制干細胞多能性的基因大家族中，這個家族已包括Oct4、Fgf4和Sox2等成員。
這表明Foxd3的功能區或是在Oct4、Fgf4 和Sox2基因的下游，或是沿一條與它們平行的通路,通過補充進非突變的胚胎干細胞到Foxd3突變的胚胎中，可以恢復胚胎的正常發育，這說明Foxd3是在內部細胞團以及衍生細胞中活動的。
Foxd3是哺乳動物干細胞的一個關鍵調控基因，在人類基因組中也存在對應的版本。Foxd3基因表達是人類胚胎干細胞的一個診斷特征，這表明這個基因在小鼠和人類細胞中可能是以相似的方式執行功能的。
如果利用干細胞作為臨床治療的手段，那么識別出控制干細胞分化過程的關鍵調控基因如Foxd3等絕對是至為重要的。
一旦了解這這些基因是如何執行功能的，距離塑造干細胞為滿足我們需要的形式就為時不遠了。
