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ELISA法測定單克隆抗體的效價的操作步驟2016/8/2
一、實驗目的1、深入了解elisa法測定抗體效價的原理。2、掌握ELISA法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來...
各種組織切片方法的操作步驟和應用范圍2016/8/1
組織切片伴隨著顯微鏡技術和免疫實驗等的發展已經得到廣泛的認同和應用。其中各種組織切片方法的操作步驟和應用范圍各不相同，本文對其中的石蠟切片、蘇木精染色、結締組織染色等方法進行介紹。(一)常規石蠟切片的...
免疫共沉淀實驗成功3大關鍵2016/8/1
一、總結的成敗因素：1.有效裂解細胞。2.恰當選擇處理樣本的方式：超聲或酶處理。3.選用適當適量抗體。4.恰當設置對照。5.不要過分交聯DNA-蛋白質。6.交聯所用的甲醛終濃度約為1%，交聯時問需要預...
實驗室常用6種耐熱DNA聚合酶總結2016/7/29
耐熱dna聚合酶多應用在PCR技術中。各種耐熱DNA聚合酶均具有5'-3'聚合酶活性，但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除錯配，切平末端;5'-3'外切酶活性可...
限制性內切酶常見問題及注意事項2016/7/29
1)購買的限制性內切酶帶有兩種不同的酶切緩沖液，該用哪一種?每種限制性內切酶帶有一管酶的zui適反應液(通常是一種4-CORE反應液)，可能還帶有一只MULTI-CORE反應液。2)4-CORE酶切緩...
蛋白質的定量法與標準曲線的制備2016/7/28
A.Folin-phenol(lowrymethod)定量法此法以Biuret方法反應為基礎發展而起，因此會嚴重干擾Biuret測定方法的因子都會影響此測定法的準確度。這些干擾因子包括：含-CS-NH...
細胞凋亡的幾種檢測方法2016/7/28
細胞凋亡的幾種檢測方法：一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒...
質譜的試劑用品、實驗操作、儀器和樣品選擇方法2016/7/27
質譜法在蛋白分析鑒定等實驗中具有不可忽視的作用，本文對其中的樣本制備試劑用品、實驗操作、質譜儀的選擇、樣品的選擇等方面進行詳細的介紹。另外，這方面的FAQ、等信息可點擊藍色的字體查看。試劑耗材：Mil...
如何選擇合適的蛋白含量測定方法2016/7/27
對許多實驗來說，確定蛋白樣品濃度是至關重要的。如果在2D電泳中，蛋白過多或過少，產生的后果都將是相當嚴重的。大多數蛋白樣品可通過比色測定法定量。在典型的蛋白測定中，化學試劑加入到蛋白樣品溶液里產生顏色...
Western Blot試劑的準備配方大全2016/7/26
WesternBlot試劑的準備配方大全:1.30%儲備膠溶液：丙烯酰胺(Acr)29.0g亞甲雙丙烯酰胺(Bis)1.0g混勻后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，棕色瓶存于室溫。2.4×分離...
Western實驗中內參基因的選擇及使用方法2016/7/26
westernBlot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言WesternBlot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然，順利的時候W...
冰凍切片的免疫組化染色操作步驟2016/7/25
冰凍切片的免疫組化染色操作步驟：1.新鮮組織立即在恒冷冰凍切片機內切片(也可-80℃保存)，厚度為5～6μm。2.載玻片可不打底，裱片后，立即用電吹風吹干。3.如不馬上染色，可密封后-20℃保存。4....
膠體金標記實驗的操作方法與步驟2016/7/25
膠體金標記實驗的實驗過程主要包含以下步驟：膠體金標記蛋白的制備及其與膠體金之間的用量比例的確定、膠體金和蛋白的結合、膠體金標記蛋白的純化與質量檢測等。1、蛋白質的處理：膠體金標記蛋白的制備膠體金對蛋白...
免疫熒光雙標實驗操作方法與注意事項2016/7/22
在同一組織細胞標本上需要同時檢測兩種抗原時，需進行雙重熒光染色。雙重免疫熒光標記法(doubleimmunofluorescencelabelingmethod)也分為直接法和間接法。(1)直接法雙重...
免疫組化中可能遇到的問題解決2016/7/22
1、石蠟切片和冰凍切片的比較?(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切...
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