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結合物即酶標記的抗體(或抗原),是ELISA中至關重要的關鍵的試劑。良好的結合物應該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當的分子比例,在結合試劑中應盡量不含有或少含有游離的(未結合的)酶或游離的抗體(或抗原),此外,結合物尚要有良好的穩定性。用于ELISA的酶應符合以下要求:①純度高②催化反應的轉化率高③專一性強④性質穩定⑤來源豐富⑥價格不貴⑦制備成酶結合物后仍繼續保存它的活性部分和催化能力⑧在受檢標本中不存在相同的酶⑨相應底物易于制備和保存
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做cellbiology實驗,細胞鋪板大概是很常見的一個實驗了。但是有很多人不是很得要領,鋪得不是均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。在這里分享一些一些技巧:1、一般96孔板每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細胞懸液混一下再,繼續加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強或次數太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入3
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犬鉤端螺旋體抗體IgG(Lep IgG)elisa試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關液體樣本中鉤端螺旋體抗體IgG(LepIgG)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中犬鉤端螺旋體抗體IgG(LepIgG)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入鉤端螺旋體抗體IgG(LepIgG),再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃 -
一.ELISA標準操作要點優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的本公司要求使用的純化水電導率小于1.5μs/cm。1.標本的采取和保存大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,
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大部分elisa檢測均以血清為標本。血清標本可按慣例方法收集,應留意防止溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標本可能會添加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會發生假陽性反應。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃。超越一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質局部濃縮,散布不均,應充沛混勻并防止發生氣泡。混濁或有沉積的血清標本應先離心或過濾,弄清后再檢測。重復凍融會使抗體效價下跌,所
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本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10ng/L-260ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中生存素(survivin)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人生存素(survivin)水平。用純化的人生存素(survivin)體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生存素(survivin),再與HRP標記的生存素(survivin)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色
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絕大多數ELISA試劑盒實驗人員頭疼的問題,莫過于試驗成果不抱負。其實做科研試驗,就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗成功。可是,我在做試驗過程中可以盡量防止哪些常犯的過錯呢?jin天讓我們一同來看一下,影響ELISA試驗成果不抱負的原因有哪些?操作應對試驗的物理參數有充沛的了解,如環境溫度(保持在18c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2.正確運用加樣器加樣器應筆直參加標本或試劑,ELISA試劑盒防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液
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如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項有哪些呢?相信很多做實驗的小伙伴都有這樣的疑問,今天小編就給大家總結一下,注意聽講哦!ELISA,全稱酶聯免疫吸附實驗,主要利用的是抗原抗體特異性結合的特點,可分為直接法、間接法、雙抗體夾心法、競爭法等。下面以間接法為例進行介紹:1、方陣ELISA。用途:①融合前后確定鼠血清中抗體效價;②拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時首先要確定包被原及抗體的優質工作濃度。經典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結果OD值P/N2的