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ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研生產(chǎn)中最為廣泛最為靈敏的技術手段。可是在新老手操作過程中總是會出現(xiàn)或大或小的問題，現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色，一個工作日基本搞定。下面就由我拋磚引玉地來說一下，做ELISA的經(jīng)驗總結:1、包被原的性質很重要，蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對于sheng物素和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被，
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使用目的：本試劑盒用于測定蝦樣本中白細胞介素6(IL-6)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中蝦白細胞介素6(IL-6)水平。用純化的蝦白細胞介素6(IL-6)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素6(IL-6)，再與HRP標記的白細胞介素6(IL-6)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素6(IL-6)呈正相關。用酶標
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使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中胎球蛋白A(FETU-A)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胎球蛋白A(FETU-A)水平。用純化的人胎球蛋白A(FETU-A)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胎球蛋白A(FETU-A)，再與HRP標記的胎球蛋白A(FETU-A)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胎球蛋白A
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生物大分子藥物是指分子量大于1000的生物活性分子，如多肽、蛋白質等。采用酶聯(lián)免疫吸附法進行生物大分子藥物制劑分析，可以對大分子抗原進行定量測定，對于生物大分子藥物制劑的早期研究和開發(fā)作用巨大。制劑中常含有賦形劑、稀釋劑和附加劑，因此與原料藥物不同。藥物制劑分析指的是對不同劑型的藥物，利用物理、化學，甚至微生物測定的方法進行分子檢測，以檢驗被檢查的制劑是否符合質量標準的規(guī)定要求。蛋白多肽類藥物具有免疫原性，因此可以采用免疫分析法測定生物體液中的蛋白多肽類藥物。常用的免疫分析方法有放射免疫分析(R
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ELISA試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種，在間接法和夾心法ELSIA中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢？一、競爭法在競爭法ELISA中，陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量，一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間，此時反應最為敏感。競爭法ELISA不易用自視判斷結果，因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異，一般均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種，
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人Toll樣受體7（TLR7）elisa試劑盒注意事項及操作
使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中Toll樣受體7（TLR7）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人Toll樣受體7（TLR7）水平。用純化的人Toll樣受體7（TLR7）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Toll樣受體7（TLR7），再與HRP標記的Toll樣受體7（TLR7）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 -
ELISA實驗失敗可能由多種因素造成。在實驗前閱讀并充分了解產(chǎn)品說明書，可以一定程度上避免出現(xiàn)意想不到的結果。參考以下提示來避免實驗出現(xiàn)問題。1.檢查試劑盒的保質期，保證所有試劑按說明書上的建議正確保存；2.檢查試劑溶液是否存在不穩(wěn)定或降解跡象，如沉淀或變色等；3.底物溶液應為無色；4.試劑制備和保存時應使用干凈的一次性塑料吸量管、槍頭和容器。每次加液（樣品、標準品及其他試劑）時，及時更換槍頭，避免交叉污染；5.確保孵育時間和溫度與規(guī)定的高度一致；6.盒中試劑不能用其他試劑替代；7.建議樣本和標
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使用目的：本試劑盒用于測定馬血清、血漿及相關液體樣本中傳染性貧血病毒抗體（IAVAb）表達。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中馬傳染性貧血病毒抗體（IAVAb）表達。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中傳染性貧血病毒抗體（IAVAb）相結合，經(jīng)洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的抗原結合，形成抗原-抗體-抗原復合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）
