谷-氨酸脫羧酶(GAD)測試盒_氨基酸代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/48樣
注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
谷-氨酸脫羧酶(GAD)測試盒_氨基酸代謝系列
測定意義:
谷-氨酸脫羧酶是將谷-氨酸轉化成抑制性神經遞質γ-氨基丁酸(GABA)的限速酶,γ-氨基丁酸是中樞神經系統中有效的抑制性神經遞質,具有降血壓、增進腦活力、營養神經細胞、保持神經安定、促進生長激素分泌和保肝利腎等作用,目前在醫藥和保健食品中已有廣泛的應用。
測定原理:
GAD 催化谷-氨酸產生 GABA,利用 berthelot 反應測定 GABA 含量,從而測定 GAD 活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 30mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 6mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 6mL×1 瓶,4℃避光保存;
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑五:液體 20mL×1 瓶,4℃避光保存;
試劑六:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑七:液體 35mL×1 瓶,4℃保存。
樣品測定的準備:
1、細菌或細胞的處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3S,間隔 10S,重復 30 次);8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織的處理:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),冰浴中勻漿。8000g ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。