氨基酸代謝系列_脯-氨酸脫氫酶(ProDH)測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
ProDH是存在于線粒體內(nèi)的催化脯-氨酸降解的關(guān)鍵酶。脯-氨酸是分布-廣泛的一種滲透物質(zhì),在脅迫條件下很多植物可以通過增加合成、減少降解而在體內(nèi)累積大量脯-氨酸,降低ProDH活性對于調(diào)節(jié)滲透平衡、防止?jié)B透脅迫對植物造成傷害、清除自由基、保護細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有重要意義。
測定原理:
利用異硫氰酸甲酯檢測ProDH催化的脫氫反應(yīng),600nm處吸光值的吸光值的變化反映酶活性的高低。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
氨基酸代謝系列_脯-氨酸脫氫酶(ProDH)測試盒
試劑的組成和配制:
提取液:100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體2 mL×1支, 4℃保存;
試劑二:液體25mL×1瓶, 4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶, 4℃保存;臨用前加入4mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶, 4℃保存;臨用前加入4mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑五:粉劑×4支,4℃保存;
粗酶液提取:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿,1500g 4℃離心15min,取上清液于一支新的EP管中,加入一滴試劑一(用10μL的槍頭加入),渦旋混勻,冰浴放置30min后,16000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測。