糖代謝系列_山梨-醇含量測試盒
測定方法:微量法
產品規格:100管/96樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
山梨-醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,不僅是糖運輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風味密切相關。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經常需要檢測山梨-醇含量變化。
糖代謝系列_山梨-醇含量測試盒
測定原理:
山梨-醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡合物,在655nm波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體3.5mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體3.5mL×1瓶 ,4℃保存。
山梨-醇的提取:
按照組織質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水),研磨成勻漿,95℃水浴10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液待測。
山梨-醇含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.352x - 0.002;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按照樣品質量計算
山梨-醇含量(mg /g 鮮重)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=2.84×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計算
山梨-醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入樣本體積,0.23mL;V2:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質
量,g
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.176x - 0.002;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按照樣品質量計算
山梨-醇含量(mg /g 鮮重)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計算
山梨-醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(V1×Cpr)=5.68×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入樣本體積,0.23mL;V2:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g
注意:-低檢測限為1μg/g鮮重或0.01μg /mg prot