糖代謝系列_ 葡萄糖含量測試盒
測定方法:微量法
產品規格:100管/96樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經系統、肌肉、脂肪組織等的唯-一能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。
糖代謝系列_ 葡萄糖含量測試盒
測定原理:
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替-比林偶聯酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水
試劑的組成和配制:
試劑一:0.5μmol/mL葡萄糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體 10ml×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體 10ml×1瓶,4℃保存;(若出現結冰現象,可37℃水浴溶解后使用)
葡萄糖提取:
1、組織的處理:按照組織質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水),研磨成勻漿,95℃水浴10分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液備用。
2、細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):蒸餾水體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL蒸餾水),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3S,間隔10S,重復30次),95℃水浴10分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液備用。