糖代謝系列_硫代葡萄糖苷含量測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
硫代葡萄糖苷(Glucosinolates),簡稱硫苷,是十字花科蔬菜中的一種重要的次生代謝產(chǎn)物,根據(jù)側(cè)鏈基團的不同,可以把硫苷分為脂肪族、芳香族和吲哚族三大類。
糖代謝系列_硫代葡萄糖苷含量測試盒
測定原理:
硫葡糖苷酶催化硫代葡萄糖苷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化 4-氨基安替-比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在 505 nm 有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器:
天平、研缽、離心機、酶標儀、96 孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存,臨用前加入 0.6mL 試劑二溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 8mL×1 瓶,4℃避光保存;
試劑四:液體 8mL×1 瓶,4℃避光保存。
樣本處理:
樣本烘干粉碎,過 100 目篩。稱 0.1g 樣本,加入 1mL 蒸餾水,100℃水浴提取 60min。冷卻至室溫,10000g 4℃離心 10min,取上清待測。
計算公式
△ 標準曲線:y = 0.9345x + 0.0043,R2 = 0△.9999;x 為標準品濃度:μmol/mL;y 為吸光度 A。硫代葡萄糖苷含量(μmol/g 鮮重△)=( A -0.0043)÷ 0.9345×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W )
=1.07×( A -0.0043)÷ W
V樣,加入樣本上清體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g。