β-1,3葡聚糖酶β-1,3-GA測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/24樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導細胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3葡聚糖酶β-1,3-GA測試盒_糖代謝系列
測定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,內切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產生還原末端,通過測定還原糖生成速率來計算其酶活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入3mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體30mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。