霍亂弧菌套裝生化鑒定管 17 種(SN1022)
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21、石蕊牛奶的反應
牛奶中主要含有乳糖和酪蛋白,在牛奶中加入石蕊是作為酸堿指示劑和氧化還原指示劑。石蕊在中性時呈淡紫色,酸性時呈粉紅色,堿性呈藍色,還原時則自上而下地褪色變白。
細菌對牛奶的作用有一下幾種:
(1)產酸――細菌發酵乳糖產酸,使石蕊變紅。
(2)產堿――細菌分解酪蛋白產生堿性物質,使石蕊變藍。
(3)胨化――細菌產生蛋白酶,使酪蛋白分解,故牛奶變得比較澄清。
(4)酸凝固――細菌發酵乳糖產酸,使石蕊變化,當酸度很高時,可使牛奶凝固。
(5)凝乳酶凝固――有些細菌能產生凝乳酶,使牛奶中的酪蛋白凝固,此時石蕊常呈藍色或不變色。
(6)還原――細菌生長旺盛,使培養基氧化還原電位降低,因此石蕊還原褪色。
接種與觀察結果:接種待測菌株,適溫培養3、5、7d或14d,按上述特征觀察和記錄牛奶產酸、產堿、凝固或胨化等反應。
22、酪素水解試驗(酪蛋白水解)
牛奶平板的制備:取5g脫脂奶粉加入50mL蒸餾水中(或用50mL脫脂牛奶),另稱1.5g瓊脂溶于50mL蒸餾水中,將兩液分開滅菌。待冷至45-50℃時,將兩液混勻倒平板,即成牛奶平板。將平板倒置過夜,使表面水分干燥,然后將菌種點接在平板上,每皿可點接3-5株菌。適溫培養1、3、5天,記錄菌落周圍和下面酪素是否已被分解而呈透明。
配制該培養基時,切勿將牛奶和瓊脂混合滅菌,以防牛奶凝固。
23、*水解
將L-*0.5g懸浮于10mL蒸餾水中,8磅20分鐘滅菌,然后于100mL無菌的營養肉湯瓊脂混合,傾倒平板,待凝固后,將測試菌接種于平皿上,培養7到14d,記錄*結晶是否被水解而變透明。
24、苯*脫氨試驗
某些細菌(如變形桿菌)具有苯*脫氨酶,能將苯*氧化脫氨,形成苯丙酮酸,苯丙酮酸遇到三氯化鐵呈藍綠色。本試驗用于腸肝菌科和某些芽孢桿菌屬的鑒定。
接種與觀察結果:將菌種接種于該培養基斜面上,適溫培養3-7d(某些芽孢桿菌須培養21d)。取10%的FeCl3水溶液4-5滴,滴加在生長菌苔的斜面上,當斜面和試劑液面處呈藍綠色時為陽性反應,表示從苯*形成苯丙酮酸。
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