近日，來(lái)自美國(guó)威斯康星大學(xué)的華人科學(xué)家Su-Chun Zhang在學(xué)術(shù)期刊Cell Stem Cell發(fā)表了一項(xiàng)研究進(jìn)展，他們利用CRISPR/CAS9技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)人類(lèi)干細(xì)胞系進(jìn)行可誘導(dǎo)基因敲除，這一方法的成功對(duì)于研究基因在干細(xì)胞及分化不同階段中的作用具有重要推動(dòng)作用。

對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行的時(shí)間調(diào)控對(duì)于闡明一個(gè)基因在生物學(xué)系統(tǒng)中的功能至關(guān)重要，但到目前為止，在人類(lèi)多能干細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)可誘導(dǎo)基因敲除，建立可誘導(dǎo)基因敲除的人類(lèi)干細(xì)胞系仍存在很大挑戰(zhàn)。

在該項(xiàng)研究中，研究人員結(jié)合CRISPR/CAS9介導(dǎo)的基因組編輯和Flp/FRT以及Cre/LoxP系統(tǒng)成功實(shí)現(xiàn)建立了可誘導(dǎo)基因敲除的人類(lèi)多能干細(xì)胞系。研究人員發(fā)現(xiàn)dual-sgRNA的靶向作用對(duì)于將FRT序列進(jìn)行的雙等位基因敲入非常重要。除此之外，他們還開(kāi)發(fā)了出一種新的策略將一個(gè)可調(diào)控活性的重組酶表達(dá)體系同時(shí)導(dǎo)入細(xì)胞，移除了藥物抗性基因，利用這種方法可以加快iKO hPSC細(xì)胞系的獲得速度。

研究人員通過(guò)這種兩步法敲除策略，對(duì)人類(lèi)胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中的SOX2,PAX6,OTX2,AGO2等基因?qū)崿F(xiàn)了可誘導(dǎo)性基因敲除，建立了相關(guān)細(xì)胞系。

研究人員相信，利用這種方法建立iKO hPSC細(xì)胞系將會(huì)改變?nèi)藗円酝鶎?duì)人類(lèi)細(xì)胞中基因功能研究的方式，對(duì)于推動(dòng)干細(xì)胞研究進(jìn)展具有重要意義hzA047Hu    人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF)
hzA548Hu    人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for InterHZllular Adhesion Molecule 1 (ICAM1)
hzA049Hu    人干擾素γ(IFNγ)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg)
hzA592Hu    人生長(zhǎng)抑素(SST)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Somatostatin (SST)
hzA575Hu    人胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Motilin (MTL)
hzA876Hu    人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)
hzA875Hu    人碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Carbonic Anhydrase I (CA1)
hzA469Hu    人內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Lipase, Endothelial (LIPG)
hzA800Hu    人妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Pregnancy Associated Plasma Protein A (PAPPA)
hzA399Hu    人高遷移率族蛋白1(HMG1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
hzA397Hu    人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta ReHZptor I (TGFbR1)
hzA396Hu    人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
hzA395Hu    人抑制素A(INHA)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Inhibin A (INHA)
hzA580Hu    人水通道蛋白2(AQP2)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 2, Collecting Duct (AQP2)
hzA578Hu    人水通道蛋白9(AQP9)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 9 (AQP9)
hzA379Hu    人胰島素原(PI)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Proinsulin (PI)
hzA807Hu    人巖藻糖苷酶αL1(FUCα1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)
hzA557Hu    人甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Thyroid Peroxidase (TPO)
hzA380Hu    人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)
hzA393Hu    人P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for SubstanHZ P (SP)
hzA902Hu    人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)
hzA386Hu    人脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Lipase, Lipoprotein (LIPD)
hzA821Hu    人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)
hzA794Hu    人周期素依賴(lài)性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)
hzA606Hu    人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Neuroglobin (NGB)
hzA607Hu    人食欲素A(OXA)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Orexin A (OXA)
hzA579Hu    人水通道蛋白1(AQP1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 1, Colton Blood Group (AQP1)
hzA581Hu    人水通道蛋白3(AQP3)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 3, Gill Blood Group (AQP3)
hzA582Hu    人水通道蛋白4(AQP4)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 4 (AQP4)
hzA583Hu    人水通道蛋白5(AQP5)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Aquaporin 5 (AQP5)
hzA394Hu    人組織因子通道抑制因子(TFPI)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)
hzA584Hu    人血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)
hzA539Hu    人髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP)
hzA585Hu    人細(xì)胞周期素D1(CCND1)ELISA試劑盒原理    ELISA Kit for Cyclin D1 (CCND1)