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EL4淋巴瘤細胞

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更新時間:2016-07-10 22:22:58瀏覽次數:455次

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EL4淋巴瘤細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)EL4淋巴瘤細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產品:
Vanoxerine  67469-69-6
Vardenafil hydrochloride trihydrate 鹽酸瓦地那非三水合物 224785-90-4
VAT BLACK 27 還原黑 27 2379-81-9
Vat Brown 1, Solubilised 可溶性還原棕1 23725-15-7
Vat Red 10 還原紅10 2379-79-5
Velneperit 韋利貝特 342577-38-2
VERATRINE HYDROCHLORIDE 西代丁鹽酸鹽 17666-25-0
Vestitol 維斯體素 35878-41-2
VILAZODONE 維拉佐酮 163521-12-8
Vildagliptin 維達列汀 274901-16-5
VILDAGLIPTIN CARBOXYLIC ACID METABOLITE  565453-40-9
Villosin C VILLOSIN C 160927-81-1
VINAGINSENOSIDE-R3  156012-92-9
Vinblastine Sulfate * 143-67-9
vincanol 長春醇 19877-89-5
Vincristine Sulfate * 2068-78-2
Vindoline 文多靈 2182-14-1
Viniferin  78690-98-9
VINOL 523 * 98002-49-4
Vinpocetine 長春西丁 42971-09-5
Vinyl-2-(2-ethoxyethoxy)ethyl ether  10143-53-0
Vinyl Acetate 乙酸乙烯酯 108-05-4
VINYL BROMOACETATE  5309-70-6
VINYL HEXANOATE 正己酸乙烯酯(含穩定劑甲氧基*) 3050-69-9
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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