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微載體培養原理與操作
其原理是將對細胞無害的微載體顆粒加入培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。
貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴增三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,因此細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵。細胞主要通過靜電引力和范德華力與微載體黏附,這取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。
由于動物細胞無細胞壁,對剪切力敏感,因此微載體培養在操作中對攪拌轉速及攪拌方式的要求都十分嚴格。微載體培養要求攪拌的速度非常慢,zui大速度75 r/min。細胞微載體培養通常分為三個時期:貼壁期,過渡期和培養期。貼壁期和過渡期可以使用超低速細胞磁力攪拌系統進行培養,該系統具有超低的攪拌速度,剪切力小且能在低速下充分混勻細胞。
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