在使用質粒酵母的同時我們需要怎么做呢？森貝伽給您提供質粒酵母是如何轉化的。
試驗試劑:
PLATE溶液: iZN ;40％聚乙二醇(PEG,分子量3350;Sigma P 3640);0.1mol/L 醋酸鋰 g;10 mmol/L Tris-HCl (pH7.5);1 mmol/L EDTA;
實驗步驟:
1、用牙簽從平板中挑取單菌落(直徑2～3mm),轉移到1.5ml的無菌離心管中.
2、將10μl載體DNA(100μg)與10μl轉化質粒DNA混合,振蕩均勻.(若轉化DNA是用未經RNA酶處理的“mini－prep DNA"方法制得,則不需加載體DNA).
3、加0.5ml PLATE溶液,振蕩.
4、置于實驗臺上,室溫培養4天.
5、置42℃下熱激15分鐘.
6、以8000～10000r/min離心10秒沉淀細胞,小心棄去上清液,將細胞輕輕懸浮到200μl無菌蒸餾水,使細胞懸浮均勻,再直接將混合液涂選擇平板.
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