在 1 × TBE 中分別用 GelRed 和 EB 預制 1% 瓊脂糖凝膠中 1Kb Plus DNA Ladder 稀釋物的電泳圖。從左至右各泳道 DNA 總量分別為 : 200 ng , 100 ng , 50 ng and 25 ng 。凝膠用 300nm 透視器顯像,用 EB 濾光片和 Polaroid 667 黑白膠片拍照
Table A. 訂貨信息
Cat# | Product Name | Unit Size | 品 牌 |
41001 | GelRedTM?Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water | 4.0 L | Biotium |
41002 | GelRedTM?Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | Biotium |
41003 | GelRedTM?Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5 mL | Biotium |
41003-1 | GelRedTM?10,000X solution in water, bulk pack | 10 mL | Biotium |
41004 | GelGreenTM?Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | Biotium |
41005 | GelGreenTM?Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5mL | Biotium |
由美國BIOTIUM公司技術專家研發南京森貝伽提供的GelGreen核酸凝膠染料現貨供應是兩種集高靈敏、低毒性和超穩定于一身的的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國*安全認定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環境污染。(下載美國Litron Laboratories, Inc. 完整安全檢測報告)
目前大多數商業化的核酸染料(凝膠染色試劑)總是在安全性、穩定性和靈敏性等方面不*令人滿意。例如,雖然 EB (溴化乙啶)作為目前使用zui廣泛的核酸凝膠染色試劑,能夠在多數應用中提供可以接受的靈敏度,但它是一種高誘變性的化學物質。而且EB染色后具有較高的背景熒光信號(如圖1)。GelGreen核酸凝膠染料現貨供應也被廠家宣傳為zui靈敏的凝膠染色試劑。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微堿性電泳緩沖溶液或預制凝膠中會快速降解,穩定性差導致染色效果極不可靠。 SYBR safe 被認為是市場上較為安全的核酸染料 ,但它的染色效果還遠不及 SYBR Green I 。
Biotium公司的無論用于預制凝膠染色還是凝膠電泳后染色,都表現出了*的靈敏度。為配合 312 nm UV 凝膠成像系統而設計的 GelRed ,在使用了我們新開發的具有的試驗步驟后(該試驗步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳統的 TBE 緩沖溶液),在凝膠電泳后染色中優于或者至少相當于 SYBR Gold 。但與 SYBR Gold 不同, GelRed 在預制凝膠中使用時仍然有*的靈敏度,事實上GelRed 在檢測低濃度、微量 DNA 方面比 EB 表現出更高的靈敏度,尤其對小分子量的 DNA 檢測非常靈敏(圖1)。 GelGreen 可以滿足使用 488 nm 激光凝膠掃描儀或者可見光激發的 Dark Reader 的研究人員的使用要求。 GelGreen 無論是在預制凝膠還是凝膠電泳后染色中都與 SYBR Green I 靈敏度相當,但不存在后者的不穩定性問題。實際上, GelRed 和 GelGreen ,特別是 GelRed 非常穩定,可以*在室溫下保存。當這兩種染料稀釋在 TBE 或者類似的電泳緩沖溶液中時甚至可以使用微波爐加熱,便于采用常規方法制備預制凝膠。含有染料的預制凝膠可以成批制備,*保存。
同樣重要的是, GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。 獨立的測試服務公司( Litron Laboratories, Inc. )進行的標準艾姆斯氏測試結果表明, 在 18.5 μ g /mL (該濃度遠高于*用于電泳后染色的 約 4 μ g/mL 的 3X 染色液 )濃度下, GelGreen 沒有誘變性,而 GelRed 也僅在 S9 代謝活化時有微弱的誘變性。 GelRed 和 GelGreen 的特殊化學結構使其難以穿透細胞膜進入細胞,正是這一特性降低了染料的細胞毒性。如圖3。相反, SYBR Green I 廣泛地用于活細胞線粒體和核 DNA 染色,這正是由于它能快速的被細胞吞入。由于已知 SYBR Green I 對紫外線導致的突變有強烈的增強作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),因此它的高細胞膜透性使它在紫外環境觀察時成為凝膠染色的主要有害物質。
特性:
gelred 高靈敏度
是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料
gelred 穩定性*
可以使用微波爐加熱,可以在室溫下保存
gelred 更安全
艾姆斯氏試驗結果表明,該染料的誘變性遠小于 溴化乙錠 ( EB )
gelred 廣泛的適應性
適用于預制凝膠和凝膠電泳后染色
gelred 染色過程簡單
與 EB 一樣,在預制膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳后染色過程也只需 30 分鐘且無需脫色或沖洗
gelred 對 DNA 和 RNA 的遷移影響極小
對核酸遷移的影響小于 SYBR Green I
gelred 與標準凝膠成像系統以及可見光激發的凝膠觀察裝置*兼容
使用 312nm 激發的 UV 凝膠成像系統時, GelRed 可以*的替代 EB ;使用 254nm 激發的 UV 凝膠成像系統或可見光激發的凝膠觀察裝置時, GelGreen 足以替代任意一種 SYBR 染料(見圖 4 中的光譜圖)
安全性測試 | ||||
SYBR Dyes | GelRed | GelGreen | ||
A) 5 min. incubation | 要想讓DNA染色劑安全,*的辦法就是設法不讓其穿透細胞膜進入活體細胞內,Biotium 做到了! | |||
B) 30 min incubation |
圖 3. 在37°C下,分別使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 對HeLa 細胞進行孵化,并分別在5分鐘(A)和30分鐘(B)后觀察。實驗顯示SYBR染料迅速進入細胞并將細胞內的核酸染成亮綠色(以上僅圖示 SYBR Green 1),而 GelRed 和 GelGreen 則因為不能穿透細胞膜而*沒有進入細胞內, 足以證明GelRed和GelGreen是安全的。
圖 4. GelGreen (綠色) GelRed (紅色)在 PBS 緩沖溶液中結合 dsDNA 后的激發和發射光譜。 |
圖 5. 室溫下, GelRed TM ( 500 nm )和 SYBR Gold ( 488 nm )稀釋在 1 × TBE 凝膠染色液中測得的吸光度隨時間變化圖。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分別為 0.029 和 0.051 。 |
Table B.以下標簽可以*地配合以上產品使用:
Cat# | Product Name | Unit Size | 品 牌 |
31021 | 1 KB DNA Ladder (100ng/uL) | 30 ug/300 ul | Biotium |
31022 | Ready-to-Use 1 KB DNA Ladder | 150 applications (1.5 ml) | Biotium |
** 一次購買5個包裝以上可獲得更優惠價格,立刻我們的。 |
鄭重聲明:
凡是市場上聲稱具有與Gelred和Gelgreen相同特性的 EB 替代品,且不指明是 Biotium 公司品牌的核酸染料,經檢驗都是通過Gelred或 Gelgreen稀釋后重新包裝的水貨,染色質量遠不及Biotium原包裝產品。我們鄙視這種損害客戶利益的行為,并堅決打擊,發現一次我們將不再向其供貨! 在此,我們呼吁用戶在購買Biotium公司產品時, 請選擇正規經銷商。