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南京森貝伽生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)人elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,兔elisa試劑盒,植物elisa試劑盒,小鼠elisa試劑盒等各種屬,可檢測(cè)樣本包括:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn),免疫組化實(shí)驗(yàn),服務(wù)周到,技術(shù)*!專業(yè)技術(shù)老師:
石蠟切片免疫組化染色實(shí)驗(yàn)步驟:
1.石蠟切片脫蠟至水:(石蠟切片染色前應(yīng)置 60℃ 1 小時(shí))。
2.過氧化氫封閉內(nèi)源性過氧化物酶:3%H2O2,室溫 10 分鐘(避光)。
3.蒸餾水洗:5 分鐘,2 次(置于搖床)。
4.抗原修復(fù):根據(jù)待檢測(cè)的抗原,選擇適當(dāng)?shù)姆椒ā?/span>
5.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床)。
6.正常血清封閉:從染片缸中取出切片,擦凈切片背面水分及切片正面組織 周圍的水分(保持組織呈濕潤(rùn)狀態(tài)),滴加正常山羊或兔血清(與第二抗 體
同源動(dòng)物血清)處理,37℃,15 分鐘。 附:正常血清配制 (或按試劑盒規(guī)定的濃度配制)
按 1:20 比例,用 PBS 配制,每張切片需要量按 50?l+5 ?l (10%拋灑量)計(jì) 算 。
7.滴加*抗體:用濾紙吸去血清,不洗,直接滴加*抗體,37℃ 2 小時(shí)
8.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床)。
9.滴加*化的二抗,37℃,40 分鐘。
10.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床)。
11.滴加三抗 (SAB 復(fù)合物),37℃,40 分鐘。
12.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床)。
13.DAB 顯色,鏡下觀察,適時(shí)終止(自來水沖終止)。 附:DAB 的配制
14.自來水(細(xì)水)充分沖洗。
15.蘇木素復(fù)染,室溫,30 秒,自來水沖洗。
16.自來水沖洗返藍(lán),15 分鐘。
17.梯度酒精脫水:
18.二甲苯透明:
19.封片:加拿大樹膠(或中性樹膠)封片。
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