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elisa試劑盒應用的范圍很廣,而且正在不斷地擴大,原則上elisa試劑盒可用于檢測一切抗原、抗體及半抗原,可以直接定量測定體液中的可溶性抗原。酶免疫試驗(EIA)結合光學顯微鏡或電子顯微鏡可進行抗原定位與結構的研究,用酶標記抗原或抗體結合免疫擴散及免疫電泳可提高試驗的敏感性。檢查抗原和半抗原方面:在內分泌方面已經用于檢測雌性激素、絨毛膜*、黃體素、胰島素、*、促甲狀腺素和孕酮等,其敏感性與RIA相當,在血液學方面可用于檢查凝固因子(如第Ⅷ凝固因子)、紅細胞抗原及結合球蛋白(Hapto Globin)等,在腫瘤方面已試用檢查甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA),對前者的敏感性已達到與放射免疫試驗相當的水平,但對CEA檢查的敏感性較低,目前尚不能用于常規診斷,在傳染病的診斷方面正在日益擴大,其中zui滿意的是用于檢查乙型肝炎表面抗原,國內外已有elisa試劑盒檢測的商品供應。檢查抗體方面:用elisa試劑盒間接法檢查抗體,已獲得對多種傳染病和寄生蟲病的血清學診斷,亦開始廣泛用于現場流行病學調查。在免疫性疾病方面有試用作自身疫病抗體測定以及對過敏的診斷,例如檢測各種過敏原的抗體、DNA抗體及甲狀腺球蛋白抗體,紅斑性痕瘡抗體等等。
大鼠elisa試劑盒實驗規則:
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
12、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
16、溫浴時間應遵守試劑盒規定。
17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性。
18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
大鼠elisa試劑盒 注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
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