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口腔鱗狀細胞癌的方法
細胞培養:
CAL27(人類鱗狀細胞癌),GH354(人子宮頸腺癌),HTB-32(人宮頸癌)細胞系,獲得自美國典型培養物保藏中心。CAL27細胞被保持在Dulbecco的改性的中等(DMEM)中,4 mM的L-*,調整含有3.7 g / L的鈉碳酸氫鹽和4.5星,g / L的葡萄糖,1%*(10,000單位/毫升),*(10,000微克/ mL)的溶液和10%胎牛血清(FBS)來自上??婆d生物試劑有限公司75厘米2 BD治療組織培養燒瓶中,在37℃下和5%CO 2在加濕室。GH354細胞也保持作為與另外的20%FBS的描述。1.5mM的L-*,從ATCC 2200 mg / L的*,和10%FBS,HTB-32細胞保持在McCoy的培養基。
細胞活力:
電鍍前細胞(粘附,增殖試驗),*處理細胞的等分試樣使用臺盼藍和活細胞進行染色,通過臺盼藍陰性細胞的數量進行計數,使用VWR科學計數商會枚舉和在Zeiss Axiovert 40倒置顯微鏡。在每一個時間點(1-3天),多口井進行了處理,采用臺盼染色,活細胞使用該程序枚舉。
它的增殖:
HPV感染改變口腔鱗狀細胞癌的增殖潛力,為了驗證我們的假設,我們進行了CAL27細胞體外增殖實驗,以確定的相對影響HPV16轉。CAL27,CAL27模擬的轉染(MTF)和CAL27轉染(HPV16)鋪板在含有牛胎兒血清(FBS),以及在不含有血清(NS)的培養基的培養基中,并測定它們的擴散超過三天,在三個單獨的,獨立的實驗。我們的研究結果表明,在顯著更高的速度從第1天-第3天CAL27-HPV16細胞增殖,增加5倍以上CAL27中的FBS的媒體(N = 48,P <0.01)。此外,CAL27-HPV16細胞能夠增殖,即使在沒有血清的速率顯著高于非轉染CAL27細胞,增加超過3.5倍,從第1天到第3天的組(n = 48,對< 0.01)。
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