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武漢普諾賽生命科技有限公司
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產品概述AnnexinV-AF647染色液用于鑒定凋亡和壞死細胞
Annexin V-AF647染色液用于鑒定凋亡和壞死細胞。
Annexin V是一種鈣離子依賴性磷脂結合蛋白，與磷脂酰PS有高度親和力，可通過細胞外側暴露的PS與凋亡早期細胞胞膜結合，將Annexin V標記熒光染料AF647利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡。
Annexin V搭配碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或7-AAD等DNA染色液使用，可區分處于不同凋亡時期的細胞。
本試劑搭配PI檢測誘導的Jurkat細胞凋亡效果如下圖所示：
實驗操作指南步驟：
細胞按照實驗方案進行凋亡誘導，300g離心5min，棄上清，收集細胞，PBS洗滌一次，輕輕重懸細胞并計數。
注：本品僅在懸浮培養的細胞中驗證，良好的細胞狀態是實驗的關鍵。貼壁生長的細胞用于凋亡檢測時，可能會因為消化等處理導致細胞的壞死或凋亡，對實驗結果可能存在不可控的影響，請謹慎處理。
取1-5×10^5重懸的細胞，300g離心5min，棄上清。用PBS洗滌細胞一次，離心后棄上清，加入500μL稀釋的1×Annexin V Binding Buffer工作液重懸細胞。
細胞懸液中加入5μL的Annexin V-AF647染色液和5μL的細胞核DNA染色液。
輕柔渦旋混勻后，室溫避光孵育15-20min。
反應完成后立即上機檢測。如不能及時檢測，請于冰上避光靜置并于1小時內完成檢測。
保存條件：
4℃可保存1年；Annexin V-AF647染色液需要避光保存。
注意事項：
為獲得的使用效果，請在3-6個月內使用，Annexin V-AF647禁止冷凍保存；
染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加；
熒光物質均易發生淬滅，進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，操作和存放過程盡量注意避光保存；
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
(本試劑產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療)
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