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廣州市皓博儀器儀表有限公司
多激發波長調制葉綠素熒光儀——Multi-Color-PAM主要功能采用的板載芯片LED陣列技術
主要功能
采用的板載芯片 LED 陣列技術,用 6 種不同波段的激發光作為測量光、光化光、飽和脈沖、單周轉飽和閃光與多周轉飽和閃光
具備比 PAM-2500 高 200 倍的靈敏度
化設計用于很稀的懸浮液(藻液、葉綠體懸浮液)測量
專用葉夾可用于高等植物/大型海藻等葉片狀樣品的測量
標準的 PAM 測量功能、復雜的多相熒光上升動力學擬合分析、馳豫動力學分析
特別適合狀態轉換研究、“非活性PSII”(“Inactive PS II”)研究
超快時間分辨率達到 10 ms,由此利用的 O-I1 相(O-J相)擬合分析用于分析PSII反映中心異質性分析,得出 PS II 光合單位的連接性參數(p和J),速率常數(Tau)和兩種不同類型 PS II(Type 1 和Type 2)的光學截面積(Sigma(II)λ)等參數
新增 PSII 有效光強 PAR(II)、經過 PSII 的電子傳遞速率 ETR(II)λ 等全新的光合參數。
專業的操作軟件,用于復雜的擬合分析
測量參數
Fo, Fm, F, Fm', Fv/Fm, Y(II), qP, qN, NPQ, Y(NO), Y(NPQ), ETR, ETR(II)λ, p, J, Tau, Sigma(II)λ, PAR、PAR(II) 等
應用領域
主要用于各種藻類的深入光合作用機理研究,用的波長、全新的測量、全新的參數進行藍藻、綠藻、硅藻、甲藻、紅藻、隱藻等的深入研究。如選配高等植物附件,也可實現對高等植物葉片的測量。
主要技術參數
測量光:提供 400、440、480、540、590 和 625 nm 的脈沖調制測量光,20 個強度選擇,14 個頻率選擇。
光化光:提供 440、480、540、590、625 nm 和 420-640 nm(白光)連續光化光照,光強 4000 μmol m-2 s-1;單周轉飽和閃光的強度 200 000 μmol m-2 s-1,持續時間 5-50 μs可調;多周轉飽和閃光強度 10 000 μmol m-2 s-1,1-800 ms可調。
遠紅光:725 nm。
信號檢測:PIN-光電二極管,帶特制鎖相放大器(設計),時間分辨率 10 μs。
Multi-Color-PAM的功能介紹
光系統 II 的相對電子傳遞速率 rETR 是很常用的一個參數。rETR = PAR × Y(II) × ETR-factor,其中 ETR-factor 是指光系統II吸收的光能占總入射 PAR 的比例。在絕大多數已發表的文獻中,均沒有試圖去測定 ETR-factor,只是簡單地假定跟 “模式葉片” 相同,即有 50% 的 PAR 分配到光系統 II,84% 的 PAR 被光合色素吸收。因此在已有的文獻中,rETR一般是用公式 rETR = PAR × Y(II) × 0.84 × 0.5 來計算的。
近期,利用多激發波長調制葉綠素熒光儀 MULTI-COLOR-PAM 可以實現光系統II的電子傳遞速率 ETR(II)λ 的測量。首先需要利用 MULTI-COLOR-PAM 測定某個波長下的光系統II功能性光學截面積 Sigma(II)λ(單位nm2)(其中λ為波長),然后求出光系統II的量子吸收速率 PAR(II) = Sigma(II)λ × L × PAR = 0.6022 × Sigma(II)λ× PAR。其中 L 為阿伏伽德羅常數,系數 0.6022 是將 1 μmol quanta m-2 (即 6.022 × 1017 quanta m-2)轉換為 0.6022 quanta nm-2,PAR(II) 的單位為 quanta/(PSII × s)。接下來就可以計算 ETR(II)λ = PAR(II) × Y(II)/Y(II)max,其中 Y(II)max 是經過暗適應達到穩態后的光系統II的量子產量,也就是 Fv/Fm×ETR(II) 的單位為 electrons/(PSII × s)。
傳統的調制葉綠素熒光儀一般只能提供一種或兩種顏色的光源,如發出白光的鹵素燈、發出藍光的藍色 LED 或發出紅光的紅色 LED 等。用不同顏色的光測量的結果可能會有不同,如圖 1A 所示,用藍光(440 nm)和紅光(625 nm)測量綠藻小球藻的快速光曲線有非常顯著的差別,藍光照射下的 rETRmax 顯著小于紅光照射下,且在較強的光曲線 rETR 有輕微下降趨勢,這說明藍光的更容易引發光抑制 (Schreiber, Klughammer et al. 2011, Schreiber, Klughammer et al. 2012)。由此可以推測,過去文獻報道的很過實驗結果,可能會存在由于采用的激發光源不同而引起的錯誤理解。
如上文所述,利用的 MULTI-COLOR-PAM,已經可以測量電子傳遞速率 ETR(II)λ。如果用 ETR(II)λ 來繪制快速光曲線會出現什么結果呢?圖 1B 是將圖 1A 的結果轉換成電子傳遞速率后得到的結果,可以看出無論是照射藍光還是照射紅光,其電子傳遞速率是一致的。由此證明圖 1A 中結果的差異是由于不同波長下藻細胞的光系統 II 功能性光學截面積 Sigma(II)λ 的大小不同引起的 (Schreiber, Klughammer et al. 2011, Schreiber, Klughammer et al. 2012)。這種利用電子傳遞速率 ETR(II)λ 繪制的快速光曲線在未來的科研中可能會發揮越來越重要的作用。
圖1 利用相對電子傳遞速率(A)和電子傳遞速率(B)分別繪制的快速光曲線(引自Schreiber et al., 2012) | |
利用 MULTI-COLOR-PAM 分別以藍光(440 nm)和紅光(625 nm)作為光化光源,測量小球藻(Chlorella sp.)的快速光曲線。 | |
圖A中,rETR 的計算采用 0.42 作為 ETR factor。 | |
圖B中,藍光和紅光激發下獲得的光系統II功能性光學截面積 Sigma(II)λ 分別為 4.547 和 1.669 nm2,計算電子傳遞速率 ETR(II)440 和 ETR(II)625 的 Fv/Fm 分別為 0.68 和 0.66。 |
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