MDCK細胞在基因制藥行業通過生物反應器規模化微載體培養后作為流感疫苗和疫苗中的接種細胞大量使用。

目前疫苗的生產工藝主要有三個：即使用雞胚直接病毒增殖工藝、轉瓶培養傳代細胞增殖病毒工藝和生物反應器微載體培養工藝。

采用生物反應器微載體培養工藝的優勢在于可以進行規模化培養，有利于提升細胞密度和病毒滴度，可以有效實現批次間的品質差異，

具有較好的穩定性和安全性，降低生產成本及材料消耗。 

Mdck細胞的生物反應器微載體培養工藝

MDCK細胞微載體培養工藝的主要步驟:

1) 處理微載體： 在進行細胞微載體時，對于GF系列微載體需要用純化水浸泡3-24H后再用PBS緩沖液清洗。而Cytodex系列微載體則可以直接用pH=7. 4的PBS緩沖液浸泡清洗，高壓滅菌，冷卻靜置，再加入細胞培養液即可；

2) 種子細胞的培養：MDCK細胞解凍復蘇后在細胞培養瓶中進行貼壁培養，當生長密度達到90%時，就可以進入轉瓶培養階段。

3)  細胞培養瓶擴培：消化后的細胞繼續加入培養基稀釋至相應倍數，接入細胞培養瓶進行種子細胞擴培。當生長致密度達90%以上時，消化細胞按照1:10的比例接入生物反應器中進行培養。

4)  微載體接種培養：在生物反應器內植入微載體，微載體密度為 2-25g/L，每個載體上的細胞數大概為5-50個左右。 

5) 病毒接種： 當生物反應器內的MDCK細胞在微載體表面的致密度達90%以上時，停止攪拌后按照要求濃度接入病毒，并進行補液操作；

6) 產物收獲： 病毒介入后10-12小時后，需要每小時取樣觀察CPE變化。當感染率大85%左右時可進行病毒收獲階段

  注意：在用搖床進行轉瓶培養時，轉速大概為2-15rpm/min ;不宜過高。細胞培養的適宜生長溫度為37°C。

            在病毒接入生物反應器后，注意攪拌器適宜轉速為：25rpm，適宜培養溫度為33°C左右，ρΗ維持在7· 5即可,溶氧率為50%。  

生產投入成本預估

采用生物反應器微載體成本根據微載體的不同，投入成本也會有所差異，采用Cytodex系列微載體按每1000L病毒收獲液估算投入成本大概為31,0000元左右；采用GF系列微載體進行生產，按每1000L病毒收獲液投入成本估算值為16,0000元左右；

生物反應器主要用于MDCK細胞、CHO細胞 、HEK293細胞培養,懸浮細胞培養、貼壁細胞培養、微載體培養、微生物培養。我們 還可以 可根據客戶要求的尺寸進行生物反應器的定制化操作， 實現了廠商直供，一罐多用，滿足不同的用戶需求。蘇州阿爾法生物還同時提供免費的安裝服務、免費技術支持、免費操作指導等服務。如需了解更多，請  或   進行詢問。