適用儀器

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備細胞板
2.根據需要處理細胞
3.從細胞板中去除培養基
4.加入海腎熒光素酶工作溶液（對于96孔板為100 µL /孔，對于384孔板為25 µL /孔）
5.在室溫下孵育5-10分鐘
6.檢測熒光強度

溶液制備  

1.工作溶液

將1體積100X熒光素酶底物（組分A）添加到100體積的測定緩沖液（組分B）中，制成海腎熒光素酶工作溶液。 注意：海腎熒光素酶工作溶液對光非常敏感，應避免光照。 另外，它不穩定，應放在冰上并在2小時內使用。

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樣品操作及分析

1.用測試化合物處理細胞（或樣品），在所需化合物緩沖液中加入10 µL 10X測試化合物（96孔板）或5 µL 5X測試化合物（384孔板）。
 
2.將細胞板在5％CO2培養箱中于37°C孵育一段時間（通常為4小時至過夜）。

3.每孔海腎熒光素酶工作溶液中加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）。

4.在室溫下避光將平板孵育5-10分鐘。 

5.用酶標儀檢測熒光強度。