豬瘟間接血凝抗體檢測ELISA試劑盒

使用說明書

【產品名稱】

通用名：豬瘟間接血凝抗體檢測ELISA試劑盒

英文名：The Indirect HaemaggLutination Assay Kit for Detecting Antibodies of Swine Fever

漢語拼音Zhuwen Jianjiexuening KangtiJiance Shijihe

【包裝規格】100頭份/盒

【主要組成】

【試驗儀器】

1．96孔110°V型科研血凝板。

2．8道或12道微量移液器。

3. 微量振蕩器。

【物理性狀】

1．抗原  搖勻呈棕紅色（或咖啡色），靜置后，血球逐漸沉入瓶底；

2．陰性對照血清  淡黃色清亮稍帶粘性的液體；

3. 陽性對照血清  微紅或淡黃色稍渾濁帶粘性的液體；

4. 稀釋液  淡黃色或無色透明液體，低溫下放置，瓶底易析出少量結晶，在水浴中加溫后即可全溶，不影響使用；

【作用與用途】

用于檢測豬瘟疫苗免疫血清抗體效價。

【用法與判定】

1 用法

1.1加稀釋液

  在血凝板上1～7排的1～10孔，第8排的1～3孔和第5～7孔，加稀釋液50μl/孔。

1.2稀釋待檢血清

  待檢血清使用前，需經過56℃水浴滅活30分鐘。取待檢滅活血清樣品50μl。分別加入反應板1～6排的第1孔中，與稀釋液混勻后吸取50μl。加于第2孔中，依次作2倍系列稀釋至第10孔，第10孔混勻后取出50μl棄去。

1.3稀釋陽性對照血清

  在血凝板的第7排第1孔加陽性血清50μl，2倍系列稀釋至第10孔，混勻后從該孔取出50μl丟棄。此時被檢血清和陽性血清的稀釋倍數依次為1:2～1:1024。

1.4稀釋陰性對照血清

  在血凝板上第8排的第1孔加陰性血清50μl，對倍稀釋至第3孔，混勻后從該孔取出50μl丟棄。此時陰性血清的稀釋倍數依次為1:2、1:4、1:8。第5～7孔為稀釋液對照，每孔僅加入50μl稀釋液。

1. 5加血凝抗原

  血清稀釋孔和稀釋對照孔加血凝抗原（充分搖勻，瓶底應無血球沉淀）50μl/孔。將反應板置微量振蕩器上震蕩2～3分鐘或用手依次四邊輕拍，直至血球分布均勻。封板膜封板，室溫（20～25℃）下靜置2～3小時判定結果，也可以延長至次日判定。

2 結果判定

  以呈現“++"血凝反應的血清稀釋度作為該血清的間接血凝抗體效價。血凝反應強度表示如下：

“++++"紅細胞全部凝集，形成一層均勻膜，布滿整個孔底。

“+++"紅細胞在孔底形成一層薄膜，面積比前者略小。

“++"紅細胞在孔底形成一層薄膜，邊緣松散或呈鋸齒狀。

“+"紅細胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集，孔底有小圓點。

“±"紅細胞沉于孔底，但周圍不光滑或中心有空斑。

“-"紅細胞沉于孔底，呈光滑的圓點。

當陽性血清抗體效價≥1:256,、陰性血清效價≤1:8、稀釋液對照孔無自凝現象時，試驗成立。接種豬瘟疫苗的豬群免疫抗體效價≥1:16為免疫合格。

【注意事項】

1. 為使你的實驗獲得正確結果，請你在使用前仔細閱讀本說明書；

2. 收到本試劑盒時，應立即打開包裝，取出血凝抗原瓶，用力搖動，使粘附在瓶蓋上的紅細胞搖下，否則容易出現沉渣，影響效果；

3. 勿使用90°和130°血凝板，建議請不要使用不合格的一次性血凝板，以免誤判結果；

4. 嚴重溶血或嚴重污染的血清樣品不易檢測，以免發生非特異性反應；

5. 每次檢測只做一份陰性、陽性和稀釋液對照；

6.用過的血凝板應及時在水龍頭下沖凈血球。再用蒸餾水或去離子水沖洗2次。甩干水分放置37℃恒溫箱內干燥備用。血凝版應該定期浸泡在洗液中也可浸泡在5%鹽酸液內，48小時撈出后清水沖凈。

【規格】 2ml/瓶

【包裝】 5瓶/盒

【貯藏與有效期】

1. 血凝抗原：2～8℃保存，切勿冷凍。保存期6個月；

2. 陰、陽性對照血清：2～8℃保存，切勿冷凍。保存期6個月；

3. 稀釋液：2～8℃保存，切勿冷凍。保存期6個月；

   4.有效期為6個月。生產日期、有效期見外包裝。