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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 脂質過氧化物(LPO)測試盒微量法

脂質過氧化物(LPO)測試盒微量法
  • 脂質過氧化物(LPO)測試盒微量法
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具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2023-12-28 20:42:30瀏覽次數:786評價

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貨號 BK-01S6411
脂質過氧化物(LPO)測試盒微量法公司正在出售的產品:乳糖莫能葡萄糖醛酸瓊脂 英文名稱:LMG Agar 產品規格:250g Tergitol-7瓊脂 英文名稱:Tergitol-7 Agar 產品規格:250g A1培養基 英文名稱:A1 Medium 產品規格:250g LesEndo瓊脂 英文名稱:m-Endo Agar,LES 產品規格:250g

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

脂質過氧化物(LPO)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6411

商品介紹:

測定意義:

脂質過氧化是動植物體內活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質過氧化物(LPO)是脂質過氧化過程的產物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關的多不飽和脂肪酸的側鏈及核酸等大分子物質起脂質過氧化反應形成LPO,使細胞膜的流動性和通透性發生改變,最終導致細胞結構和功能的改變。因此,LPO常被作為機體氧化應激的一種指標,與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關。

測定原理:

LPO在酸性條件下加熱,產生小分子終產物MDAMDA與硫代酸(thiobarbituric acidTBA)縮合,生成紅色產物,在535nm有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品:

分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250mL Maleate Buffer(馬來酸緩沖液),0.2M,pH7.0  Maleate Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

25OD 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結構類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

2 ug pMelBac B pMelBac B 低溫運輸,-20℃保存

0.1mL×10 Origami B(DE3) plysS感受態細胞  Origami B (DE3) plysS Competent Cell -80℃保存

25g 多聚甲醛 Paraformaldehyde 密封干燥保存

50T 人FGFR3 1138G/A多態性檢測試劑盒(PCR-RLFP)  低溫運輸,-20℃保存

25 mg TMRE Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

500mL Carbonate Buffered Saline(鹽緩沖鹽水),5X,pH9.5  Carbonate Buffered Saline,5X,pH9.5  常溫保存

10mL 電泳級溴藍溶液 Bromophenol Blue Solution,EG 常溫避光干燥保存

2 ug pHANNIBAL pHANNIBAL 低溫運輸,-20℃保存

沙氏葡萄糖肉湯培養基(EP) Sabouraud-dextrose Broth 250g

脂質過氧化物(LPO)測試盒微量法Cyclooxygenase 1/COX1  前列素氧化環化1抗體 規格: 0.1ml

MAP65/ASE 1  擬南芥MAP65蛋白抗體 0.2ml

Phospho-c-Fos(Thr232)  磷酸化c-fos抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml

C3orf24  3號染色體開放閱讀框24抗體 規格: 0.2ml

BOLA1  BOLA1蛋白抗體 規格: 0.2ml

ARTS  凋亡相關蛋白TGFb信號抗體 規格: 0.2ml

phospho-A Raf(Ser214)  磷酸化A-Raf抗體 規格: 0.1ml

BRMS1  轉移抑制基因1抗體 規格: 0.1ml

MuRF1/Trim63  肌肉細胞特異性泛素蛋白連接1抗體 規格: 0.1ml

SPINK1/SPINK3  瘤相關胰蛋白抑制劑1抗體 規格: 0.1ml

MARCH7/Axotrophin  膜相關環指蛋白7抗體 規格: 0.2ml

 


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