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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法

二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法
  • 二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法
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具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2023-12-29 07:08:08瀏覽次數:1318評價

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貨號 BK-01S6429
二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法公司正在出售的產品:蔗糖胰蛋白胨肉湯 英文名稱:Sucrose Tryptone Broth 產品規格:200 雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST) 英文名稱: 產品規格:250g 消毒液中和肉湯 英文名稱:Disinfectant Neutralization Broth 產品規格:250g 吐溫稀釋液 英文名稱:Lecithin polysorbate(LP)

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6429

商品介紹:

測定意義:

DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關,能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

測定原理:

DAO催化尸胺產生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰聯茴香胺生成有色物質,在460nm處有特征吸收峰,通過測定該波長吸光度增加速率,計算DAO活性。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pUG35 pUG35 低溫運輸,-20℃保存

50次 柱式糞便DNAout Column Stool DNAOUT 常溫

125mL RIPA Buffer without SDS,2X RIPA Buffer without SDS,2X 常溫保存

雙歧桿菌瓊脂培養基 Bifidobacterium BS Medium 250g

100g 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷 TRIS(Tris(Hydroxymethyl)Aminomethane) 室溫干燥保存

50T 豬鏈球菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

50 T ATP測試盒(組織及細胞膜不需高速離心) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

500mL Krebs-Henseleit Buffered Solution  Krebs-Henseleit Buffered Solution  常溫保存

50次 兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)  

2 ug pLVTH-siGFP pLVTH-siGFP 低溫運輸,-20℃保存

游離測定培養基 Free Biotin Assay Medium 250g

二胺氧化酶(DAO)測試盒微量法AHI1  白相關蛋白AHI1抗體 規格: 0.2ml

CD337/NKp30/NCR3  細胞毒性受體NK-p30抗體 規格: 0.1ml

ARHGAP24  Rho GTP激活蛋白24抗體 規格: 0.2ml

ER-alpha/beta  雌激素受體α/β抗體 規格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1ml

PPAPDC3  磷脂酸磷酸2結構域3抗體 規格: 0.2ml

KCTD12  鉀離子通道多聚體結構域蛋白12抗體 規格: 0.1ml

Lipin 1  磷脂酸磷酸酯LPIN1抗體 規格: 0.2ml

CACH2/CaV1.2  L型鈣通道蛋白抗體 規格: 0.1ml

RMND5B  RMND5B蛋白抗體 規格: 0.2ml

ACY1/Aminoacylase 1  氨基?;?抗體 規格: 0.2ml

JAKMIP2/NECC1  JAK和微管相互作用蛋白2抗體(JAK和微管相互作用蛋白2) 規格: 0.2ml

 


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