Protein L Magnetic Beads蛋白L磁珠

Protein L Magnetic Beads是大小均勻的，表面共價綴合超純的重組蛋白 L（純度> 95％）的二氧化硅基質的超順磁珠。與蛋白 A 或蛋白G 磁珠相比，蛋白 L 磁珠可更廣泛的與小鼠、人和大鼠的 Ig 的類和亞類結合，使抗體純化更靈活。當需要使用的一級抗體選定時， 此磁珠在免疫沉淀和細胞分選中特別適用。該磁珠還可用于從幾種物種的血清樣本、腹水液、血漿或組織培養上清液中快速高效地一步純化抗體。表 1 總結了蛋白 L 對不同抗體的結合特異性。

產品特點： 

·適用于快捷，簡便的一步高通量程序，無需純化柱或過濾器，或者重復的移液或離心(Fig.1)

·由于磁珠的親水性表面，非特異性結合率極低

·結合容量

·對樣本體積要求低，便于自動化操作

·性價比高

產品屬性：

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緩沖液成分：

·Protein L Beads (懸浮在 10 mM Tris, 0.15 M NaCl, 0.1% BSA,1 mM EDTA, pH7.4, 0.1% NaN3 緩沖液中)

·1x Binding/Washing Buffer (0.1 M 磷酸鈉，0.15 M 氯化鈉, pH 7.2)

·1x Elution Buffer (0.2 M Glycine/HCl,pH 2.5)

·1x Neutralization Buffer (1.0 M Tris-HCl, pH 9.0)

·Storage buffer (10 mM Tris, 0.15 M NaCl, 0.1% BSA,1 mM EDTA, pH 7.4, 0.1% NaN3)

所需耗材：

磁力分離器（適用于手動操作）：根據實驗時生物

一、模板DNA：PCR反應需要模板DNA，如從細胞、組織、血液中提取DNA等；

二、引物：PCR反應的兩個引物，分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區域，引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物；

三、dNTPs：PCR反應中需要四種dNTPs，包括脫氧腺苷酸（dATP）、脫氧胸苷酸（dCTP）、脫氧鳥苷酸（dGTP）、脫氧胞嘧啶酸（dTTP），用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程，用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增；

四、Taq DNA聚合酶：PCR反應需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等，用于擴增DNA鏈；

五、PCR buffer溶液：對PCR反應具有緩沖作用，調節反應pH，硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛，可增強PCR反應特異性，從而提高反應效率；

六、酶切體系：PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟，常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準，用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒：用于純化PCR反應產物；

①Oligo dT
選擇Oligo dT時，要求RNA必須有Poly A，所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT，對RNA樣品的質量要求較高，不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應，建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT，尤其適合模板豐度很低的情況（比如某個gene表達量很低）。選擇隨機引物時，鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板，然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系，一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng，如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng，可能會導致小片段產物（＜500bp）的增加和長片段、全長產物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物（GSP）是某個基因序列的一部分，與模板互補的引物。該引物需要結合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結合，每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此，當分析多種目標時，則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同，所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物，建議對退火溫度進行優化。