操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

人體結腸癌組織提取物【Cancer: Human Colon Cancer Derivatives】
結腸癌是消化道常見的惡性腫瘤，按形態的不同可以分為腫塊型(軟癌)結腸癌、侵潤型(硬癌)結腸癌和潰瘍型結腸癌。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體結腸癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人體結腸癌組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。

注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Nalidixic acid sodium salt酸化蛋白激酶B抗體anti- MAVS; VISA antibody載脂蛋白B48(APOB48)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

NAPHTHOL AS-BI PHOSPHATE酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體anti- MAX antibody受蛋白(PLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Naphthol AS-BI phosphate disodium salt酸化內收蛋白a1抗體anti- MBD2 antibody真核翻譯起始因子3A(EIF3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

NYLON 6酸化腺苷單酸活化蛋白激酶α1抗體anti- MBD3 antibody43kDa膠原凝集素(CL43)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

NILE RED酸性神經酰胺酶1抗體anti- MBD4 antibody血管緊張素轉化酶2(ACE2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

MUCIC ACID酸化腎上腺素能受體β2抗體（β2-AR ）anti- MBD5 antibodyApelin 13蛋白(AP13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Guanosine 5'-monophosphate disodium salt膜粘連蛋白6抗體anti- MBIP antibody周期素依賴性激酶1(CDK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

URIDINE 5'-DIPHOSPHOGLUCOSE DISODIUM SALT2號染色體開放閱讀框88抗體anti- MBIP antibody周期素依賴性激酶2(CDK2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

人體結腸癌組織提取物Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..MYC結合蛋白2抗體Human RXRB(Retinoic acid receptor RXR-beta) ELISA Kit醛酶1(AOX1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ../富含卷曲蛋白1抗體Human NR1I2(Nuclear receptor subfamily 1 group I member 2) ELISA Kit血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Schizosaccharomyces pombe Lindner微管相關蛋白9抗體Human RARB(Retinoic acid receptor beta) ELISA Kit11-β-羥基類固醇脫酶3(HSD11β3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..有絲分裂驅動蛋白樣1抗體Human ZFHX3(Zinc finger homeobox protein 3) ELISA Kit腎腫瘤抗原(RAGE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..結核分枝桿菌抗體Human RTN3(Reticulon-3) ELISA Kit趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Dictyostelium mexicanum Cavender et al.肌肉骨骼受體激酶抗體Human ABCC1(Multidrug resistance-associated protein 1) ELISA Kit腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

freeze-dried膜相關環指蛋白1抗體Human RUNX1T1(RUNX1 translocation partner 1) ELISA Kit巨噬細胞炎性蛋白4α(MIP4α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Collybia dryophila (Bulliard : Fries) Kumme ..膜相關環指蛋白2抗體Human TPSAB1(Tryptase alpha/beta-1) ELISA Kit碳酸酐酶Ⅸ(CA9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)