BY4741感受態細胞經特殊工藝制作，可用于DNA的化學轉化，經pYES2質粒檢測轉化效率高達103cfu/ugDNA-80℃可保存三個月。

基因型為:MATahis31leu2met15ura3-52

產品特點:

BY4741菌株來源于釀酒酵母原始菌株-S288C，是實驗室的常用菌株，為配子MATa型，廣泛應用干鈉,鉀離子平衡:細胞抗鹽:各種金屬離子的吸收;重金屬毒性;各種糖類，碳源對真核生物細胞生長的影響:過氧化物，超氧化物的吸收與運輸的研究中。BY4741釀酒酵母為zuansuan、liangansuan、jialiuansuan、niaomiding缺陷型菌株，可直接通過PEG/LiAc將DYES2質粒轉化進入 BY4741 細胞內。質粒pYES2的篩選標志為URA可用 SD-URA 板板進行篩選。

操作方法:

1.取100pl冰上融化的BY4741感受態細胞，依加入預冷的目的質1-3gCarier DNA(96℃

水浴3min,快速冰浴3min，重復一次)10pl，PEG/LiAc500ul并吸打幾次混勻，30℃水浴30min(15min 時翻轉 6-8 次混勻)。-

*備注:Carrier DNA 加入請提前變性處理:95-100℃5min快速冰浴重復一次置干冰浴5min之內使用

2.將感受態移到42℃水浴15min(7.5min 時翻轉6-8次混勻)。

3.5000rpm離心40s棄上清，ddH400ul重懸離心30s棄上清4ddH O50ul重盤涂板29℃培養48-96h

注意事項:

1.感受態細胞zuihao在冰上融化。

2.轉化高濃度的質粒可相應減少最終用于涂板的菌量。

3.同時轉化 2-3 種質粒時可增加質粒的用量

4.若使用DVES2 質粒表達蛋白,需在培養基中加入2%的半乳糖(篩選培養基中不用加半乳糖:

需要目的蛋自表達時，需加入半乳糖代替葡萄糖作為碳源)，以誘導目的基因的表達。

5.酵母為直核生物.不易長期保存。隨感受態在-800保存時間的延長，轉化效率會不斷下修建議

保存時間不超過90天

6.BY4741酵母菌株對高溫敏感zuishi生長溫度為27-30℃高于31℃生長速度和轉化效率呈指數下降

7.酵母在缺陷培養基中生長速度比YPDA培養基慢，培養基中缺陷成分越多,生長越慢，以轉化涂

板為例:涂YPDA 平板29℃48h培養可見直徑1mm克隆;涂SD單缺平板29℃48-60h培養可見直徑1mm 克降。涂 SD 雙缺平板29℃60-80h培養可見直徑1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃ 80-90h培養可見直徑1mm克隆。