產(chǎn)品特點(diǎn)

★配備9對(duì)隨即引物，一次性獲得的未知序列，結(jié)果真實(shí)性達(dá)9999%。

★高擴(kuò)增性： 擴(kuò)增成功率、產(chǎn)物特異性、產(chǎn)量均有顯著提高。

★長(zhǎng)片段擴(kuò)增性： 長(zhǎng)步移可達(dá)3.2kb，通常情況下，一次可步移1.5 kb左右；而T公司的染色體步移試劑盒只能步移200-500bp。

★提高工作效率：巧妙引物設(shè)計(jì)（免去了酶切和加接頭等繁瑣的實(shí)驗(yàn)步驟）, 12小時(shí)即可完成PCR擴(kuò)增到轉(zhuǎn)化克隆的全過程。干一天的工作等于以往三天的工作量。

■ 產(chǎn)品說明

染色體步移技術(shù)（Genome Walking）是一種重要的分子生物學(xué)研究技術(shù)，使用這種技術(shù)可以有效獲取與已知序列相鄰的未知序列。染色體步移技術(shù)主要有以下幾方面的應(yīng)用：

1.根據(jù)已知的基因或分子標(biāo)記連續(xù)步移，獲取人、動(dòng)物和植物的重要調(diào)控基因，可以用于研究結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)調(diào)控。如分離克隆啟動(dòng)子并對(duì)其功能進(jìn)行研究；

2.步查獲取新物種中基因的非保守區(qū)域，從而獲得完整的基因序列；

3.鑒定T-DNA或轉(zhuǎn)座子的插入位點(diǎn)，鑒定基因槍轉(zhuǎn)基因法等轉(zhuǎn)基因技術(shù)所導(dǎo)致的外源基因的插入位點(diǎn)等；

4.用于染色體測(cè)序工作中的空隙tianbu，獲得完整的基因組序列；

5.用于人工染色體PAC、YAC和BAC的片段搭接。

對(duì)于基因組測(cè)序已經(jīng)完成的少數(shù)物種（如人、小鼠、線蟲、水稻、擬南芥等）來說，可以輕松地從數(shù)據(jù)庫中找到某物種已知序列的側(cè)翼序列。但是，對(duì)于大多數(shù)生物而言，在不了解它們的基因組序列以前，想要知道一個(gè)已知區(qū)域兩側(cè)的 DNA 序列，只能采用染色體步移技術(shù)。

以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的染色體步移的主要問題是在預(yù)先不了解未知區(qū)域序列信息的情況下，如何設(shè)計(jì)兩個(gè)特異性引物來擴(kuò)增未知區(qū)域。而傳統(tǒng)的染色體步移方法，如：反向 PCR 法、連接接頭法等，都有操作復(fù)雜、非特異性擴(kuò)增、連接效率低等弊端。

本試劑盒是一種根據(jù)已知基因組 DNA 序列，高效獲取側(cè)翼未知序列的試劑盒。相對(duì)于其它傳統(tǒng)方法，本試劑盒具有高效、簡(jiǎn)便、特異性高、靈敏度高、一次性獲得的未知序列較長(zhǎng)等特點(diǎn)。其主要原理是根據(jù)已知DNA序列，分別設(shè)計(jì)三條同向且退火溫度較高的特異性引物（SP Primer），與試劑盒中提供的四種經(jīng)過*設(shè)計(jì)的退火溫度較低的兼并引物，即 ZFP1、ZFP2、ZFP3、ZFP4、ZFP5、ZFP6、ZFP7、ZFP8、ZFP9進(jìn)行熱不對(duì)稱 PCR 反應(yīng)。通常情況下，其中隨機(jī)選四種至少有一種兼并引物可以與特異性引物之間利用退火溫度的差異進(jìn)行熱不對(duì)稱 PCR 反應(yīng)，通過三次巢式PCR 反應(yīng)即可獲取已知序列的側(cè)翼序列。如果一次實(shí)驗(yàn)獲取的長(zhǎng)度不能滿足實(shí)驗(yàn)要求時(shí)，還可以根據(jù)次步移獲取的序列信息，繼續(xù)進(jìn)行側(cè)翼序列獲取。此外，本試劑盒中還含有 Control DNA 及 Control Primer，可以方便進(jìn)行 Control 實(shí)驗(yàn)。