編號 | 組分名稱 | 貨號(規格) | 保存方法 | ||
HP12-100Kit | HP12-200Kit | HP12-1000Kit | |||
1 | Solid Pimonidazole HCl | 100mg | 200mg | 1000mg | 室溫或2-8℃ |
2 | Anti-pimonidazole High Titer rabbit IgG1 monoclonal antibody (PAb27) | 200μl | 200μl | 2×200μl | 2-8℃ |
HypoxyprobeTM PAb27 Kit內一抗為高滴度的兔IgG1單克隆抗體,克隆clone 10-14-15。
產品特異性:
缺氧細胞(pO2≤10mm Hg)中,Pimonidazole被還原后得以活化。這一活化的中間物與蛋白質、多肽和氨基酸中的巰基基團(thiol groups)形成穩定的加合物。
HP-Red-PE-MAb與組織和細胞培養物內的缺氧細胞內產生的Pimonidazole加合物特異結合。
使用指南:
- Animal Studies 動物研究
研究正常或腫瘤組織缺氧首先通過靜脈注射(intravenous infusion)、腹腔注射(intraperitoneal injection)或口服(oral ingestion)法給Hypoxyprobe-1溶液,劑量為60mg/kg體重。比如,25g小鼠的探針用量為1.5mg/只小鼠。(高達400mg/kg的劑量用于小鼠無可見毒性或引起組織缺氧變化,但60mg/kg以低成本給予良好的染色結果)。
給藥后,Hypoxyprobe-1分布到包括大腦的所有組織,且僅僅在氧濃度≤14μM(相當于pO2=10mm Hg,37℃)的細胞內與蛋白質巰基形成加合物。除了腫瘤之外,正常組織如肝臟、腎臟和皮膚含pO2等于或低于10mm Hg的細胞,也會結合Hypoxyprobe-1。
2、Tissue cultures 組織培養
通常情況下,細胞懸液置于含100-200μM Hypoxyprobe-1的缺氧環境中孵育1-2h。之后細胞離心涂片、固定、FTIC-MAb1和anti-FITC chromogenic secondary染色。