我們的Cell Meter™檢測試劑盒是一套用于監測細胞生存力的工具。有多種參數可用于監測細胞活力。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰siansuan(PS)的轉運來監測細胞凋亡。在細胞凋亡中,PS轉移到質膜的外部小葉。磷脂酰siansuan在細胞表面的出現是細胞凋亡的初始/中間階段的通用指標,可以在觀察形態變化之前進行檢測。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰siansuan(PS)的轉運來監測細胞凋亡。該試劑盒使用我們專有的基于熒光小分子的Apopxin™PS傳感器,該傳感器以比膜聯蛋白V(Kd<10 nM)高得多的親和力特異性結合PS。與膜PS結合后具有藍色熒光。它可以以微孔板,顯微鏡和流式細胞儀的形式使用,而大多數其他商業凋亡檢測試劑盒只能與顯微鏡或流式細胞儀平臺一起使用。
熒光酶標儀 | |
激發 | 405納米 |
發射 | 450納米 |
隔斷 | 420納米 |
推薦板 | 黑墻/透明底 |
儀器規格 | 底讀模式 |
成分A:Apopxin™紫羅蘭色450(100X儲備液) | 1小瓶(100 µL) |
組分B:測定緩沖液(4°C) | 1瓶(10毫升) |
用測試化合物制備細胞(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)
加入等量的Apopxin™Violet 450工作溶液
在室溫下孵育1小時
監視Ex / Em = 405/450 nm(截止= 420 nm)的熒光強度(底部讀取模式)或使用裝有紫羅蘭色濾光片的熒光顯微鏡
重要說明
開始實驗之前,請在室溫下溫熱測定緩沖液(組分B)。
將10μL100X Apopxin™紫羅蘭色450(組分A)添加到1 mL的測定緩沖液(組分B)中,并充分混合以制成Apopxin™紫羅蘭色450工作溶液。注意: 100μLApopxin™Violet 450工作溶液足以用于一口井。使用前準備新鮮。
程序
通過向PBS或所需的緩沖液中加入10X /孔(96孔板)或2.5 µL /孔(384孔板)的10X測試化合物儲備溶液來處理細胞。對于空白孔(不含細胞的培養基),添加相同量的化合物緩沖液。
將細胞板在5%CO 2和37°C的培養箱中孵育所需的時間(對于用星形孢菌素處理的Jurkat細胞,需要4-6小時)以誘導凋亡。注意:由于在405 nm激發時,從380至490 nm的寬發射光譜,某些化合物(例如xishujian)可能會產生假陽性反應。
在每個孔中添加100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Apopxin™Violet 450工作溶液。
在避光條件下,于室溫下孵育細胞板至少1小時。
以800 rpm的速度離心細胞板(特別是非粘附細胞)2分鐘(制動)。
使用熒光酶標儀(底部讀取模式)在Ex / Em = 405/450 nm(截止= 420 nm)或使用帶有紫色濾光片的熒光顯微鏡對圖像池進行熒光強度監測。
Cell Meter™磷脂酰siansuan凋亡檢測試劑盒 *綠色熒光,適合微孔板檢測* Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Microplate Readers* 1 kit Cell Meter™磷脂酰siansuan凋亡檢測試劑盒 *紅色熒光,適合微孔板檢測* Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Red Fluorescence Optimized for Microplate Readers* 1 kit Cell Meter™磷脂酰siansuan凋亡檢測試劑盒 *深紅色熒光,適合微孔板檢測* Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Deep Red Fluorescence Optimized for Microplate Readers* 1 kit