本產品采用層析式雙抗體夾心法快速檢測核酸擴增產物。與傳統的瓊脂糖凝膠電泳檢測相比,檢測試紙條操作簡單,判讀迅速,不含有毒物質,無需任何儀器設備。用戶僅需在第yi個檢測序列引物設計時將一條引物/探針標記(Biotin),另一條引物/探針標記異硫氰酸熒光素(FITC)或6-羧基熒光素(6-FAM),在第二個檢測序引物設計時將一條引物/探針標記(Biotin),另一條引物/探針標記di高辛(Digoxin).并確保兩種標記物可同時整合到雙鏈擴增產物上,即可使用本產品進行檢測。如果采用內參設計,請將內參片段標記物設計為di高辛。
預期用途:
核酸擴增產物的檢測。
包裝規格/貨號:
包裝規格:10條/包×5,鋁箔袋防潮包裝。
圖1. 一次性檢測試紙條結構示意圖
儲存條件及有效期:
儲存條件:存放于避光干燥處,儲存溫度4~30℃。
有效期:12個月。
操作步驟:
根據檢測樣品數量取出相應數量的試紙條,并在吸收墊(圖1)上做好標記。每根試紙條只能用于單次、單個樣品的檢測。擴增產物體積為50~100µL時,可直接在200µL PCR反應管中檢測核酸產物,產物體積不足50µL時,需在PCR管內加超純水補足體積至50µL,吸打混勻后,才能進行檢測。
PCR、RPA或RAA反應結束后,打開PCR反應管,將試紙條結合墊端(箭頭端)插入PCR反應管(圖1),液面不得超過結合墊zui上端,待判讀區全部浸潤(約需1~2min,外界環境溫度較低時,如冬季,會降低吸水速度,判讀區浸潤時間將會延長),待質控線(C線)顯色后,可以將試紙條拿出。根據試紙條xianse情況直接讀取檢測結果。
質控線(C線)顯色后10min內觀察結果,10min后判讀無效。
記錄檢測結果,將試紙條密封丟棄在安全處。
結果判讀:
圖2. 一次性檢測試紙條結果判讀示意圖
陽性(+):
試紙條出現一條藍色條帶,位于質控線(C線);2條紅色條帶,位于檢測線(T線)。陽性結果表明樣本中含有待檢測的核酸片段,且其數量≥試紙條的zui低檢出量。當目的核酸產物濃度較低時,試紙條C線顯色呈藍色,T線呈淡紅色,甚至淺粉色條帶,該結果也應判定為陽性。當目的核酸產物濃度較高時,試紙條C線顯色呈紅色,T線呈紅色,該結果也應判定為陽性。
陰性(-):
試紙條質控線(C線)出現一條藍色條帶,檢測線(T線)沒有條帶。陰性結果表明樣本中不含目的核酸片段,或其數量低于試紙條的zui低檢出量。
無效:
試紙條質控線(C線)和檢測線(T線)均未出現條帶,提示所用的試紙條或擴增試劑可能已經損壞、失效或操作有誤。
此時,應仔細閱讀說明書,重新擴增和檢測。如果問題仍然存在,應立即停止使用同一批號的產品,并與當地供應商南京沃博生物。
注意事項及安全提示:
本產品僅供科研使用。使用前請仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書操作。違反或者未按說明書進行操作可能導致錯誤結果。
產品應依照說明書要求,儲存于合適的環境和溫度下,并在有效期內使用。儲存不當或產品過期可能導致錯誤結果。打開包裝后請盡快使用試紙條,以免因試紙條受潮影響試驗結果。檢測環境光線不足,操作者色弱等因素均可能能導致錯誤結果。
用完畢后,應盡快將紙條裝進密封袋,妥善處理。本產品為一次性使用產品,請勿重復使用。
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