常見的報道基因包括β-半乳糖苷酶，β-葡萄糖醛酸苷酶和螢光素酶。通用的報告基因是螢火蟲熒光素酶。由于這些報告分子較小并且不需要ATP，因此其他熒光素酶（例如海腎熒光素酶）的使用穩步增加。我們的Amplite™Renilla螢光素酶報告基因基因檢測試劑盒旨在提供一種快速，靈敏的方法來檢測海三色堇（Renilla reniformis）中的螢光素酶。它使用專有的發光配方來定量基于細胞的測定中的海腎熒光素酶活性。我們的配方可產生一種發光產品，當與海藻熒光素酶相互作用時可提供強力發光。該套件提供了所有必要的組件。它具有很高的靈敏度，可以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行。半衰期為一小時的“發光型”信號在大量測定板中提供一致的信號。該測定法與標準細胞生長培養基兼容。該試劑盒可以測量野生型和合成的hRluc基因的主要表達或基因表達。

1. 準備細胞板
2. 根據需要處理細胞
3. 從細胞板中去除培養基
4. 加入海腎熒光素酶工作溶液（對于96孔板為100 µL /孔，對于384孔板為25 µL /孔）
5. 在室溫下孵育5-10分鐘
6. 監控發光強度

重要說明
使用前，將所有套件組件解凍至室溫。對于所有發光實驗，建議使用白板以獲得*結果。

1.將一體積的100X熒光素酶底物（組分A）添加到100體積的測定緩沖液（組分B）中，制成海腎熒光素酶工作溶液。 注意：重新配制的海腎熒光素酶工作溶液對光非常敏感，應避免光照。此外，它不穩定，應準備新鮮，放在冰上，并在2小時內使用。
程序

1. 通過在所需化合物緩沖液中加入10 µL 10X測試化合物（96孔板）或5 µL 5X測試化合物（384孔板）來用測試化合物處理細胞（或樣品）。
    
2. 將細胞板在5％CO ₂培養箱中于37°C孵育所需的時間，通常為4小時至過夜。
    
3. *取出介質。
    
4. 每孔海腎熒光素酶工作溶液添加100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）。
    
5. 將板在室溫下孵育5-10分鐘。避光。
    
6. 用發光計監控發光強度。

數據分析

1e+51e+410001001010001001010.11e-2- Dose-ResponseData legendGenerated with Quest Graph™Renilla Luciferase (pg/well/100µL)RLUHover mouse to interact

從空白標準孔獲得的讀數（RLU）用作陰性對照。從其他標準的讀數中減去該值即可得到基線校正值。然后，繪制標準讀數，以獲得標準曲線和方程式。該方程可用于計算海腎熒光素酶樣品。