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A10胚胎大鼠主動脈平滑肌細胞(STR鑒定)

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更新時間:2018-05-25 15:50:43瀏覽次數:278次

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產品簡介

A10胚胎大鼠主動脈平滑肌細胞(STR鑒定)
英文名稱:Embryonic Rat Aortic Smooth Muscle Cells
1)來源:主動脈平滑肌
2)形態:三角形,梭形
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

詳細介紹

A10胚胎大鼠主動脈平滑肌細胞(STR鑒定)
英文名稱:Embryonic Rat Aortic Smooth Muscle Cells
規格:1*10 6  
細胞介紹
一、細胞特性
1)來源:主動脈平滑肌
2)形態:三角形,梭形 
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
A10胚胎大鼠主動脈平滑肌細胞(STR鑒定)
在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;

  1. 凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
  2. 存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
  3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。

相關細胞系列表:

Human/人 人肝內膽管上皮細胞;HIBEpiC

Human/人 人肝竇狀小管內皮細胞;HHSEC

Human/人 人皮膚T淋巴細胞瘤細胞;HH

Human/人 人胃癌細胞(未分化)HGC-27

Human/人 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞系;HFSF

Human/人 SV40轉染人成骨細胞;hFOB1.19

Human/人 人胚肺成纖維細胞;hfl-I

Human/人 人肺成纖維細胞;HFL1

Human/人 人成纖維細胞;HFF-1

關鍵詞:培養箱 顯微鏡

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